Embrió minősége - Embryo quality
Az embrió minősége az embrió azon képessége , hogy sikeresen teljesít a magas terhességi arány elérése és/vagy egészséges ember születése szempontjából. Az embrióprofilozás az embrió minőségének becslése különböző paraméterek minősítésével és/vagy számszerűsítésével. Az embrió minőségére vonatkozó becslések irányítják az embrió kiválasztásának választását az in vitro megtermékenyítésben .
Általánosságban elmondható, hogy az embrióprofilozás a terhességi arányok előrejelzésére elsősorban a vizuális profilokra és a rövid távú biomarkerekre összpontosít, beleértve az RNS és a fehérjék expresszióját , lehetőleg az embriók környezetében, hogy ne károsítsák őket. Másrészről, az embrió -profilozás az egészség előrejelzése érdekében nagyobb hangsúlyt fektet a genomra , és ahol fennáll a genetikai rendellenesség kockázata, gyakrabban magában foglalja az embrióból származó sejtmintavételt a preimplantációs genetikai diagnózis érdekében .
A terhességi arányok előrejelzése
Mikroszkópia
Az embrió minőségét főleg mikroszkóppal értékelik bizonyos időpontokban, morfológiai pontozási rendszer alkalmazásával. Ez azt mutatta, hogy jelentősen javul a terhesség aránya .
A time-lapse mikroszkópia a mikroszkópia kiterjesztése, ahol az embriók morfológiáját idővel tanulmányozzák. 2014-től kezdve az embrió minőségének értékelésére szolgáló time-lapse mikroszkópia a kísérleti stádiumból kezd kialakulni, és elegendő bizonyítékkal rendelkezik a szélesebb körű klinikai használatra. Az EmbryoScope (tm) time-lapse inkubátorral végzett vizsgálatokban számos mutatót használtak az embrió minőségére, például az 1–3 sejtből történő közvetlen hasítást, valamint a tömörítés és a blasztuláció megkezdését. Ezenkívül az 1PN vagy 3PN állapotokon átmenő kétpronukleáris zigóták (2PN) általában rosszabb minőségű embriókká fejlődnek, mint azok, amelyek állandóan 2PN maradnak.
Molekuláris elemzés
A molekuláris analízis elvégezhető az egyik sejt embrióból történő kivételével. Az elemzés kiterjedhet egyetlen cél -biomarkertől a teljes genomig , transzkriptómáig , proteómáig és metabolomig . Az eredmények felhasználhatók embriók pontozására, összehasonlítva a mintákat azokkal, amelyeket korábban találtak sikeres és sikertelen terhességű embriók között:
Átiratprofilozás
A transzkriptom értékelés során az emberi embriók génexpressziós profilozási vizsgálatai jogi és etikai kérdések miatt korlátozottak.
A petesejtet és a korai embriót vagy a granulosa sejteket körülvevő gomborsejtek génexpressziós profilozása alternatívát kínál, amely nem magában az embrióból történő mintavételt foglalja magában. A gomolysejtek profilozása értékes információkkal szolgálhat a petefészek hiperstimulációs protokoll hatékonyságáról , és közvetve előre jelezheti a petesejtek aneuploiditását, az embriófejlődést és a terhesség kimenetelét anélkül, hogy invazív eljárást kellene végrehajtani közvetlenül az embrióban.
Ezenkívül a mikroRNS-ből (miRNS) és a sejtmentes DNS-ből (cfDNS) mintákat lehet venni az embriók környékéről, amelyek embrionális minőségű transzkriptomszint-markerként működnek.
Proteomprofilozás
Az embriók proteomprofilozását közvetve ki lehet értékelni az embriók közelében található fehérjék mintavételével, ezáltal biztosítva az embrióprofilálás nem invazív módszerét. Az ilyen profilozás során értékelt fehérje markerek például a CXCL13 és a granulocita-makrofág kolóniastimuláló faktor , ahol az alacsonyabb fehérjemennyiség magasabb beültetési arányhoz kapcsolódik. Az oldható HLA-G jelenléte másik paraméternek tekinthető, ha választani kell az azonos minőségű embriók között.
A lehetőségek egy másik szintje érhető el azáltal, hogy az embrióprofil értékelését az anyai állapothoz igazítják, például az egészségi állapot vagy az immunrendszer állapota tekintetében, amelyet esetleg tovább részletezhet az anyai genom, a transzkriptoma, a proteoma és a metabolom hasonló profilozása. Két példa a fehérjékre, amelyek az anyai profilalkotásban szerepelhetnek, az endometriumból származó stathmin 1 és az annexin A2 , amelyek lefelé és felfelé történő szabályozása a sikeres beültetés magasabb arányához kapcsolódik.
Genomprofilozás
A meglévő randomizált, kontrollált vizsgálatok szisztematikus áttekintése és metaanalízise arra az eredményre jutott, hogy nincs bizonyíték a PGP jótékony hatására az élő születési arány alapján mérve . Éppen ellenkezőleg, az előrehaladott anyai korú nők esetében a PGP jelentősen csökkenti az élő születési arányt. A technikai hátrányok, mint például a biopszia invazivitása és a kromoszóma -mozaikosság a PGP hatástalanságának fő tényezői.
Az embrióminőség szempontjából a genomiális profilozás egyik fő hátránya, hogy az eredmények általában egyetlen sejt értékelésén alapulnak, a PGP -nek saját korlátai vannak, mivel a vizsgált sejt a mozaikosság miatt nem reprezentatív az embrióra .
Ha előrehaladott anyai korú nőknél és ismétlődő IVF -kudarcban szenvedő betegeknél alkalmazzák, a PGP -t elsősorban szűrővizsgálatként végzik a kromoszóma -rendellenességek, például aneuploidia , reciprok és Robertson -transzlokációk kimutatására , és néhány esetben egyéb rendellenességek, például kromoszóma -inverziók vagy deléciók kimutatására. . Az alapelv az, hogy mivel ismert, hogy a számszerű kromoszóma -rendellenességek magyarázzák a terhességvesztés legtöbb esetét, és az emberi embriók nagy része aneuploid, az euploid embriók szelektív cseréje növeli a sikeres IVF -kezelés esélyeit . Az átfogó kromoszóma-elemzési módszerek közé tartozik a tömb-összehasonlító genomiális hibridizáció (aCGH), a kvantitatív PCR és az SNP tömbök . A 3. napi embriók egyetlen blastomere biopsziájával kombinálva az aCGH nagyon robusztus, mivel a vizsgált embriók 2,9% -a eredménytelen, és alacsony hibaaránnyal jár (1,9%). Nincs bizonyíték arra, hogy az embrió kóros kromoszómaszámra való vizsgálata növelné az élveszületések számát.
A specifikus rendellenességek szűrésén túl olyan technikákat fejlesztenek ki, amelyek akár teljes genomszekvenálást is igénybe vehetnek , amelyből a genetikai profilozás pontozhatja a DNS -mintákat, összehasonlítva azokkal, amelyeket korábban találtak sikeres vagy sikertelen terhességű embriók között.
Egészségjóslat
Az embrióból származó személy egészségi állapotának előrejelzésére jelenleg alkalmazott fő módszer a preimplantációs genetikai diagnózis (más néven preimplantációs genetikai szűrés , preimplantációs genetikai profilalkotás vagy PGP) annak meghatározására, hogy a kapott személy örököl -e egy adott betegséget vagy sem. Másrészt a meglévő randomizált kontrollált vizsgálatok szisztematikus áttekintése és metaanalízise arra az eredményre jutott, hogy nincs bizonyíték a PGP jótékony hatására az élő születési arány alapján mérve . Éppen ellenkezőleg, az előrehaladott anyai korú nők esetében a PGP jelentősen csökkenti az élő születési arányt. A technikai hátrányok, mint például a biopszia invazivitása és a kromoszóma -mozaikosság a PGP hatástalanságának fő tényezői.