Immunizálás - Immunofixation
Immunfixációs kimutatását teszi lehetővé, és tipizálása monoklonális antitestek vagy immunglobulinok a szérumban vagy a vizeletben . Nagyon fontos bizonyos vérrel összefüggő betegségek, például mielóma diagnosztizálása és monitorozása szempontjából .
Elv
A módszer kicsapással detektálja : amikor az oldható antigént (Ag) érintkezésbe hozzák a megfelelő antitesttel , kicsapódás lép fel, amely szabad szemmel vagy mikroszkóppal látható.
Az immunofizálás azonosítja a keverékben lévő antitesteket azok specifikus elektroforetikus mobilitásának függvényében . Az azonosítás céljából olyan antigéneket használnak, amelyek specifikusak a célzott ellenanyagra.
Pontosabban, az immunizálás lehetővé teszi olyan betegségek, például mielóma vagy Waldenström makroglobulinémia reprezentatív monoklonális antitestek kimutatását .
Technika
Ez a módszer egy szérum (vagy vizelet, amelyet korábban koncentráltunk) minta lerakását egy gélen. Egy olyan elektromos áram alkalmazása után, amely lehetővé teszi a fehérjék méretük szerinti elválasztását, az egyes immunoglobulin típusokra specifikus antitesteket fektetnek a gélre. Ennélfogva úgy tűnik, hogy többé-kevésbé szűk sávok vannak a gélen, amelyek különböző immunglobulinoknál vannak.
Az immunizálás mint immunoelektroforézis két lépésben zajlik:
- Az első lépés mindkét technika esetében azonos. A szérumban vagy a vizeletben található immunoglobulinokat lerakják egy gélen, majd az immunoglobulinokat elválasztják az elektroforézis mobilitásuknak megfelelően azáltal, hogy elektromos mező hatására vándorolnak. Ez a migráció az antigén tömegétől és töltésétől függ. Miután az immunglobulinok elválasztódtak, továbbmehetünk a következő lépésre.
- A második lépés az alkalmazott technikán alapul. A immunizálás elektroforézist igényel a szérumfehérjék replikátumban történő migrációjához. Ezután specifikus anti-immunglobulin antiszérumot alkalmazunk az egyes replikátumok kezelésére. Ehhez az antiszérumot nem egy csatornába helyezik, mint az elektroforézis során, hanem külön-külön hozzáadják az egyes vándorlási sávokhoz. A monoklonális immunglobulin jelenléte szűk sávot eredményez, miután a festési komplex kicsapódott. Például egy IgG lambda esetében keskeny sáv lesz, mind a pályán, amelyre anti-G letétbe helyeztek, mind pedig azon, amelyen az anti-lambda lerakódott.
érdem
Az immunizálás általában helyettesíti a fehérje elektroforézist, mert:
- gyorsabb (eredmény három órán belül);
- kissé érzékenyebb. Az immunizálás immunoglobulint tárt fel, amely kihagyta a fehérje elektroforézist, különösen alacsony koncentrációkban (kevesebb, mint 1 gramm / liter);
- részben automatizálható, és több laboratóriumban is felhasználható;
- könnyebben olvasható és értelmezhető.
demerits
Az immunizálás azonban csak az immunglobulinokra érzékeny és drágább, mint a fehérje elektroforézis.
források
Lásd még
Külső linkek
- MedlinePlus Encyclopedia 003543 - " Immunizálás - szérum"
- MedlinePlus Encyclopedia 003593 - " Immunizálás - vizelet"
- Diagram a Pittsburgh- i Egyetemi Orvostudományi Iskolában