Immunizálás - Immunofixation

Immunfixációs kimutatását teszi lehetővé, és tipizálása monoklonális antitestek vagy immunglobulinok a szérumban vagy a vizeletben . Nagyon fontos bizonyos vérrel összefüggő betegségek, például mielóma diagnosztizálása és monitorozása szempontjából .

Elv

A módszer kicsapással detektálja : amikor az oldható antigént (Ag) érintkezésbe hozzák a megfelelő antitesttel , kicsapódás lép fel, amely szabad szemmel vagy mikroszkóppal látható.

Az immunofizálás azonosítja a keverékben lévő antitesteket azok specifikus elektroforetikus mobilitásának függvényében . Az azonosítás céljából olyan antigéneket használnak, amelyek specifikusak a célzott ellenanyagra.

Pontosabban, az immunizálás lehetővé teszi olyan betegségek, például mielóma vagy Waldenström makroglobulinémia reprezentatív monoklonális antitestek kimutatását .

Technika

Ez a módszer egy szérum (vagy vizelet, amelyet korábban koncentráltunk) minta lerakását egy gélen. Egy olyan elektromos áram alkalmazása után, amely lehetővé teszi a fehérjék méretük szerinti elválasztását, az egyes immunoglobulin típusokra specifikus antitesteket fektetnek a gélre. Ennélfogva úgy tűnik, hogy többé-kevésbé szűk sávok vannak a gélen, amelyek különböző immunglobulinoknál vannak.

Az immunizálás mint immunoelektroforézis két lépésben zajlik:

  • Az első lépés mindkét technika esetében azonos. A szérumban vagy a vizeletben található immunoglobulinokat lerakják egy gélen, majd az immunoglobulinokat elválasztják az elektroforézis mobilitásuknak megfelelően azáltal, hogy elektromos mező hatására vándorolnak. Ez a migráció az antigén tömegétől és töltésétől függ. Miután az immunglobulinok elválasztódtak, továbbmehetünk a következő lépésre.
  • A második lépés az alkalmazott technikán alapul. A immunizálás elektroforézist igényel a szérumfehérjék replikátumban történő migrációjához. Ezután specifikus anti-immunglobulin antiszérumot alkalmazunk az egyes replikátumok kezelésére. Ehhez az antiszérumot nem egy csatornába helyezik, mint az elektroforézis során, hanem külön-külön hozzáadják az egyes vándorlási sávokhoz. A monoklonális immunglobulin jelenléte szűk sávot eredményez, miután a festési komplex kicsapódott. Például egy IgG lambda esetében keskeny sáv lesz, mind a pályán, amelyre anti-G letétbe helyeztek, mind pedig azon, amelyen az anti-lambda lerakódott.

érdem

Az immunizálás általában helyettesíti a fehérje elektroforézist, mert:

  • gyorsabb (eredmény három órán belül);
  • kissé érzékenyebb. Az immunizálás immunoglobulint tárt fel, amely kihagyta a fehérje elektroforézist, különösen alacsony koncentrációkban (kevesebb, mint 1 gramm / liter);
  • részben automatizálható, és több laboratóriumban is felhasználható;
  • könnyebben olvasható és értelmezhető.

demerits

Az immunizálás azonban csak az immunglobulinokra érzékeny és drágább, mint a fehérje elektroforézis.

források

Lásd még

Külső linkek