Szövegírás - Tissue typing

A szöveti tipizálás olyan eljárás, amelyben a leendő donor és a recipiens szöveteinek kompatibilitását vizsgálják a transzplantáció előtt . A donor és a befogadó szövetek nem egyezőek a szövetek kilökődéséhez vezethetnek. A szöveti tipizálásnak számos módszere létezik.

Áttekintés

HLA lokuszok feltérképezése a 6. kromoszómán

A szöveti tipizálás során azonosítják az egyén humán leukocita antigénjeit (HLA). A HLA molekulák a sejtek felszínén vannak bemutatva, és megkönnyítik az immunsejtek (például dendritikus sejtek és T-sejtek ) közötti kölcsönhatásokat , amelyek adaptív immunválaszhoz vezetnek . Ha a donorból származó HLA-t a recipiens immunrendszere felismeri, hogy az eltér a recipiens saját HLA-jától, akkor a donor szöveteivel szemben immunválasz váltható ki. Pontosabban, a szerv donorok és a recipiensek közötti HLA eltérések az anti-HLA donor specifikus antitestek (DSA) kialakulásához vezethetnek . A DSA-k szorosan kapcsolódnak a donor szövetek kilökődéséhez a recipiensben, és jelenlétüket az antitest által közvetített kilökődés indikátorának tekintik. Ha a donor és a recipiens HLA egyezik, akkor a donor szöveteket lényegesen nagyobb valószínűséggel fogadja el a recipiens immunrendszere. A szöveti tipizálás során számos HLA gént kell tipizálni mind a donorban, mind a recipiensben, beleértve a HLA I. osztályú A , B és C géneket, valamint a HLA II. Osztályú DRB1 , DRB3 , DRB4 , DRB5 , DQA1 , DQB1 , DPA1 géneket és DPB1 gének. A HLA tipizálást megnehezíti, hogy a HLA régió a genetikailag leginkább variábilis régió az emberi genomban.

A szöveti tipizálás módszerei

Ez a diagram a szerológiai tipizálást mutatja. A diagram felső felében a sejt HLA-típusához megfelelő antitestet adtunk hozzá, így a komplement aktiválódása következett be, ami sejtlízishez vezetett. A sejt lízise azt jelzi, hogy a hozzáadott antitest megegyezik a sejt HLA típusával, így a sejt HLA típusa akkor ismert. A diagram alsó felében egy olyan HLA antitestet adtunk hozzá, amely nem egyezett a sejt HLA típusával, így nem volt komplement aktiválódás, és nem történt sejtlízis.

A szöveti tipizálás egyik első módszere a szerológiai tipizálás volt. Ebben a technikában, a donor vérsejtek HLA tipizált, hogy összekeverjük őket a szérum , amely anti-HLA antitestek . Ha az antitestek felismerik epitópjukat a donor HLA-ján, akkor a komplement aktiváció a sejtek líziséhez és pusztulásához vezet , lehetővé téve a sejtek festékének felvételét ( tripánkék ). Ez lehetővé teszi a sejtek HLA azonosítását közvetett módon a szérumban található ismert antitestek specifitása alapján. Ezt a módszert széles körben használják, mivel egyszerű, gyors és olcsó; a HLA allélek óriási változékonysága azonban azt jelenti, hogy a tesztelhető sejtek HLA-specifikus antitesteket tartalmazó szérum nem biztos, hogy rendelkezésre áll. A szerológiai tipizálás nem ad tiszta képet a HLA régióról, és nem mindig eredményez sikeres HLA tipizálást, ezért sok laboratórium abbahagyta a hatékonyabb módszerek javát.

A közelmúltban más hatékonyabb megközelítések jelentek meg, beleértve a szekvencia-specifikus primereken (SSP) vagy szekvencia-specifikus oligonukleotid próbákon (SSOP) alapuló polimeráz láncreakció ( PCR ) alkalmazását . Az SSP-PCR azonban idő- és erőforrásigényes is lehet. Az SSOP-PCR jobb, ha HLA tipizálja a nagyszámú egyedet, például nagyszámú donort a csontvelő-regiszterekhez. Az RT-PCR egy másik megközelítés a HLA tipizálásához, amely gyors és sokoldalú, de drága.

A referencia szál-mediált konformációs elemzés (RSCA) még egy módszer, amelyet a HLA tipizálására használnak. Ebben a módszerben egy ismeretlen HLA mintát összekeverünk egy referenciaalléllel, és elektroforézissel gélben futtatjuk . Az RSCA-t korlátozza a rendelkezésre álló HLA referenciaallélok száma, mivel a HLA régió annyira változatos.

Közvetlen DNS-szekvenálás tekinthető jelenleg a legjobb módszer a HLA-tipizálás, akár Sanger szekvenálás vagy a következő generációs szekvenálás , bár ez is időigényes, és az egyik a drágább módszereket. RNS szekvenálás is használható, de sok laboratórium nem, mivel az RNS instabil és hajlamos a lebomlásra.

Lásd még

Hivatkozások

Külső linkek