Ziehl – Neelsen folt - Ziehl–Neelsen stain
A Ziehl – Neelsen festés egy saválló folt, amelyet először Paul Ehrlich vezetett be . A Ziehl – Neelsen festés egy bakteriológiai festék, amelyet saválló szervezetek, elsősorban mikobaktériumok azonosítására használnak . Nevét két német orvosról kapta, akik módosították a foltot: Franz Ziehl bakteriológus (1859–1926) és Friedrich Neelsen (1854–1898) patológus .
Mikobaktériumok
Az anatómiai patológiai mintákban az immunhisztokémia és a Ziehl – Neelsen festés módosításai (például a Fite-Faraco módszer ) összehasonlítható diagnosztikai hasznossággal rendelkeznek. Mindkettő jobb, mint a hagyományos Ziehl -Neelsen festés.
A Mycobacterium nemzetség lassan növekvő baktérium, kis rúdból áll, amelyek enyhén íveltek vagy egyenesek, és gram -pozitívnak tekinthetők. Egyes típusú mikobaktériumok ágakat vagy szálakat képeznek. Néhány mikobaktérium szabadon élő szaprofit, de sok olyan kórokozó, amely állatokat és embereket okoz betegséget. A Mycobacterium bovis tuberkulózist okoz szarvasmarhákban. Mivel a tuberkulózis emberre is átterjedhet, a tejet pasztőrözik, hogy elpusztítsa a baktériumokat. Néhány Mycobacteria faj, amely emberben betegséget okoz, a Mycobacterium leprae , Mycobacterium kansasii , Mycobacterium marinum , Mycobacterium bovis , Mycobacterium africanum és a Mycobacterium avium komplex tagja. A Mycobacterium tuberculosis a Mycobacterium egyik faja, amely tuberkulózist (TB) okoz . A Mycobacterium tuberculosis egy levegőben lévő baktérium, amely jellemzően megfertőzi az emberi tüdőt. A TBC tünetei közé tartozik a rossz köhögés, mellkasi fájdalom, fáradtság, fogyás, étvágytalanság, hidegrázás, láz és éjszakai izzadás. A látens TBC -fertőzés kezelésének tipikus kezelési rendje magában foglalja az izoniazid, a rifapentin és a rifampin alkalmazását. A kezelési rend módosul azok számára, akiknél gyógyszer -rezisztens TB -törzs alakult ki. A tbc-vizsgálat magában foglalja a vérvizsgálatot, a bőrteszteket és a mellkasi röntgenfelvételt. Amikor a tuberkulózisra vonatkozó keneteket nézzük, saválló folt segítségével festjük. Ezek a saválló organizmusok, mint például a Mycobacterium, nagy mennyiségű lipidanyagot tartalmaznak sejtfalukban, az úgynevezett mikolsavakat. Ezek a savak ellenállnak a festésnek olyan szokásos módszerekkel, mint a Gram -festés . Néhány más baktérium, például a Nocardia festésére is használható . A Ziehl – Neelsen festéshez használt reagensek a következők: karbol -fukszin , savas alkohol és metilén -kék . A saválló bacilusok festés után élénkvörösek.
Gombák
A Ziehl – Neelsen festés egyfajta keskeny spektrumú gombafolt. A keskeny spektrumú gombafoltok szelektívek, és segíthetnek a gombák megkülönböztetésében és azonosításában. A Ziehl – Neelsen festés eredményei változóak, mivel sok gombasejtfal nem saválló. Egy példa a saválló gombák egyik tipikus típusára, amelyet általában Ziehl – Neelsen festéssel festenek, Histoplasma (HP). A hisztoplazma megtalálható a talajban, valamint a madarak és denevérek ürülékében. Az emberek hisztoplazmózist kaphatnak a gomba spórái belégzésével. A hisztoplazma belép a szervezetbe, és a tüdőbe kerül, ahol a spórák élesztőgomba alakulnak. Az élesztő a véráramba kerül, és hatással van a nyirokcsomókra és a test más részeire. Általában az emberek nem betegszenek meg a spórák belélegzésétől, de ha mégis, akkor általában influenzaszerű tüneteik vannak. Ennek a festési módszernek egy másik variációját használják a mikológiában a Russula nemzetség egyes gombafajainak kutikuláris hifáiban a saválló lerakódások eltérő megfestésére . Néhány szabad endospóra összetéveszthető a kis élesztőgombákkal, ezért festéssel azonosítják az ismeretlen gombákat. Néhány protozoa, nevezetesen a Cryptosporidium és az Isospora azonosításában is hasznos . A Ziehl – Neelsen folt paragonimiasis esetén is akadályozhatja a diagnózist, mivel a petesejt és parazita (O&P) köpetmintájában lévő tojásokat a folt fel tudja oldani, és gyakran használják ebben a klinikai környezetben, mert a paragonimiasis jelei és tünetei nagyon hasonlítanak a tbc -sek.
Történelem
1882 -ben Robert Koch felfedezte a tuberkulózis etiológiáját. Nem sokkal Koch felfedezése után Paul Ehrlich kifejlesztett egy foltot a mycobacterium tuberculosis számára, amit timsó hematoxylin foltnak neveztek. Franz Ziehl ezután megváltoztatta Ehrlich festési technikáját karbolsav felhasználásával. Friedrich Neelsen megtartotta Ziehl választóanyagát, de az elsődleges foltot karbol -fukszinná változtatta. Ziehl és Neelsen módosításai együtt kifejlesztették a Ziehl – Neelsen foltot. Egy másik saválló foltot Joseph Kinyoun fejlesztett ki a Ziehl – Neelsen festési technika alkalmazásával, de eltávolította a hevítési lépést az eljárásból. A Kinyoun új foltját Kinyoun foltnak nevezték el.
Eljárás
Egy tipikus AFB festési eljárás magában foglalja a sejtek szuszpenzióban történő leengedését egy tárgylemezre, majd a folyadék levegőn történő szárítását és a sejtek hőre rögzítését.
A saválló folt összefoglalása (Ziehl – Neelsen folt) | |||||
---|---|---|---|---|---|
Felhasználása | Reagens | Sejt színe | |||
Gyorsan sav | Nem sav gyors | ||||
Elsődleges festék | Carbol fuchsin | Piros | Piros | ||
Színtelenítő | Savas alkohol | Piros | Színtelen | ||
Számlálófolt | Metilénkék / malachitzöld | Piros | Kék |
Tanulmányok kimutatták, hogy a tenyészet nélküli AFB -folt gyenge negatív prediktív értékkel rendelkezik. AFB -tenyésztést kell végezni AFB -festéssel együtt; ennek sokkal nagyobb negatív prediktív értéke van.
A mechanizmus magyarázata
Kezdetben a carbol fuchsin minden sejtet megfest. Ha savas alkohollal foltosítják őket, csak a nem saválló baktériumok szennyeződnek le, mivel nem rendelkeznek vastag, viaszos lipidréteggel, mint a saválló baktériumok. Ha ellenfoltot alkalmaznak, a nem saválló baktériumok felveszik és kék (metilén-kék) vagy zöld (malachitzöld) lesz, ha a mikroszkóp alatt nézzük. A saválló baktériumok megtartják a karbol-fukszint, így pirosnak tűnnek.
Módosítások
- 1% kénsav -alkohol actinomycetes , nocardia ellen .
- 0,5–1% kénsav -alkohol izoszpóra , cikloszpóra oocisztákhoz .
- 0,25–0,5% kénsav -alkohol a bakteriális endospórákhoz.
- Differenciális festés - jégecetet használnak, hőkezelés nélkül, másodlagos folt Loeffler metilénkék.
- Kinyoun módosítás (vagy hideg Ziehl – Neelsen technika) is rendelkezésre áll.
- Egy protokoll, amelyben mosószert helyettesítenek a rendkívül mérgező fenolra a fukszin festőoldatban.
Lásd még
Példák online protokollokra
- Ziehl – Neelsen protokoll ( PDF formátum).
Hivatkozások
Bibliográfia
- "Mikrobiológia betegségekkel a testrendszer szerint", Robert W. Bauman, 2009, Pearson Education, Inc.
Külső linkek
- Ziehl-Neelsen folthoz kapcsolódó média a Wikimedia Commons-ban