Sejtbank - Cell bank
A sejtbank olyan létesítmény, amely meghatározott genom sejtjeit tárolja jövőbeni felhasználás céljából egy termékben vagy gyógyászati szükségletben. Gyakran tartalmaznak nagy mennyiségű alapsejtanyagot , amelyek felhasználhatók különböző projektekhez. A sejtbankok felhasználhatók a sejtvonalak részletes jellemzésének előállítására, és segíthetnek a sejtvonal keresztszennyeződésének enyhítésében is . A sejtbankok felhasználása csökkenti a sejttenyésztési folyamatok költségeit is, költséghatékony alternatívát kínálva a sejtek folyamatos tenyésztésében. A sejtbankokat általában olyan területeken használják, ideértve az őssejtkutatást és a gyógyszereket is, a krioprezerválás a hagyományos módszer a sejtanyag érintetlen állapotban tartására. A sejtbankok hatékonyan csökkentik a sejtminták diverzifikálódásának gyakoriságát az idő múlásával.
Tárolás
Mielőtt az adományozott sejtvonalakat raktárba helyeznék, először elszaporodnak, és nagyszámú azonos sejtre szaporodnak, mielőtt számos krióvában tárolódnának . A sejtekkel együtt krioprotektáló szereket is adnak az injekciós üvegekhez, hogy megvédjék a sejteket a jégkristályoktól való fagadással szemben a fagyasztási folyamat során. A 10% DMSO oldat gyakori krioprotektív szer. Ezeket a kriovialokat ezután egy tálcába helyezzük, felcímkézzük a sejtvonal genetikai adataival, és kriogén fagyasztókba tesszük. A fagyasztók nitrogént tartalmaznak akár folyékony, akár gőz formában, és a sejteket percenként -1 és -3 Celsius fok közötti sebességgel fagyasztják, amíg el nem érik a -196 Celsius fok hőmérsékletet. -196 Celsius fokos hőmérsékleten az anyagcsere folyamatok jelentősen lelassulnak, hogy megállítsák az összes sejtnövekedést, ezzel megőrizve a sejtvonalat, ami különösen akkor hasznos, ha a sejtvonalnak korlátozott számú sejtosztódása van. A sejtek ebben az állapotban hosszabb ideig tárolhatók, csökkentve a sejtanyag lebomlásának sebességét.
Fagyasztó
Az emlőssejtek általános fagyasztási folyamata magában foglalja a kérdéses sejtek kis sűrűségének szuszpendálását egy krioviumban lévő krioprezerválószerek oldatában, és a sejtek fagyasztását -196 Celsius fokos hőmérsékletre. A lassú fagyasztási sebesség fontos a sejttenyészet egészségének megőrzéséhez. A sejtek fagyasztása -1 és -3 Celsius fok / perc közötti sebességgel általában elfogadható a sejttenyészetek egészségének fenntartása érdekében. A túl gyors fagyás a sejtek károsodását kockáztatja. A percenként -5 Celsius fokos fagyási sebességnél a megolvasztott sejttenyészet jelentős csökkenése figyelhető meg. A sejttenyészet egészségi állapotának még kifejezettebb csökkenése figyelhető meg gyorsabb fagyasztási sebesség mellett, olyan mértékben, hogy a sejttenyészet nem képes fenntartani a sejtek sűrűségét. A fagyasztási folyamat kulcsa a krioprezerváló szerek használata is. A szokásos krioprotektív szer a DMSO 10% -os oldata, amely megvédi a sejteket a jégkristályok fagyasztás és felolvasztás során bekövetkező repedésétől. Megállapították, hogy a DMSO toxikus a sejtekre, és a sejtek felolvasztása után hígítást igényel.
Kiolvasztás
Gyors olvadás ajánlott a sejtek krioprezervációból való kivezetése és a normális anyagcsere-folyamatok beindítása érdekében. Fontos a krioviál és annak tartalmának szobahőmérsékletű vagy környezeti hőmérsékletnek való kitettségének minimalizálása. A gyors olvadások fontosak annak megakadályozására, hogy az injekciós üveg tartalma gyorsan megolvadjon és ne fagyjon le, ami jégkristályok repedését okozhatja az injekciós üveg sejtjeiben. Az olvadás néhány perc alatt elvégezhető 37 ° C körüli hőmérsékletű vízfürdőben. Kísérletekkel kimutatták, hogy lassabb olvadás ellenőrzött környezetben, például inkubátorban, szintén alkalmazható a kriofagyasztott sejtek biztonságos felolvasztására. Az inkubátorban történő felolvasztás elkerüli a vízfürdőben történő felolvasztással járó szennyeződés kockázatát, azonban lényegesen hosszabb időt és erőforrást igényel. Olvadás után a sejteket át kell vinni a krioviálból egy másik edénybe, és a tápközegben újra szuszpendálni kell. A jelenlévő krioprotektív szer koncentrációjának hígításával mérsékelhetők a metabolikusan aktív sejtekre gyakorolt negatív hatások, például a kriprotektáló szerek toxicitása.
Történelem
Eredetileg a tudósok sejtanyag-gyűjteményeket tartottak saját felhasználásra, de nem a tudományos közösség számára. Az első személy, akit akkreditáltak egy sejtbank széles körű felhasználására, Kral csehszlovák tudós volt, aki az 1890-es évek végén hozta létre sejtbank-gyűjteményét.
Jelenleg nagy számban vannak „kultúragyűjtemények és bioforrás-központok”, amelyek a biomérnöki folyamat egyes részét szolgálják . Néhány példa ezekre a Kulturális Gyűjtemények Világszövetsége és a Nemzetközi Biológiai és Környezeti Adattárak Társasága. 2003 januárjában létrehozták az Egyesült Királyság őssejtbankját , amely központi egységként szolgál a mintagyűjtés és az emberi tesztelés során. A Nemzeti Őssejtbankot 2005 októberében hozták létre Madisonban, Wisconsinban , annak érdekében, hogy kimondottan az őssejtvonalak tárházaként szolgáljon. Jelenleg 13 a világon létező 21 őssejtvonalból áll, amelyek szerepelnek az Országos Egészségügyi Intézetek által üzemeltetett Őssejt-nyilvántartásban .
1987-ben az Egészségügyi Világszervezet referenciasejt-bankot hozott létre, hogy forrást biztosítson az oltások és más biológiai gyógyszerek kifejlesztéséhez. Újabb referenciasejt-bankot hozott létre az Egészségügyi Világszervezet 2007-ben az MRC-5 sejtekkel kapcsolatos stabilitási problémák eredményeként .