Szövettan - Histopathology
Kórszövettani (vegyület három görög szó: ἱστός histos „szövet”, πάθος pátosz „szenvedés”, és -λογία -lógia „tanulmány”) utal, hogy a mikroszkopikus vizsgálata szövet annak érdekében, hogy tanulmányozzák a megnyilvánulásai betegség . Pontosabban, a klinikai orvostudományban a szövettani vizsgálat a biopszia vagy a sebészeti minta patológus általi vizsgálatára utal , miután a mintát feldolgozták és a szövettani metszeteket üveglemezekre helyezték. Ezzel szemben a citopatológia a szabad sejteket vagy szöveti mikrotöredékeket ("sejtblokkokat") vizsgálja.
Szövetek gyűjtése
A szövetek szövettani vizsgálata műtéttel , biopsziával vagy boncolással kezdődik . A szövetet eltávolítják a testről vagy a növényről , majd gyakran friss állapotban végzett szakértői boncolást követően rögzítőbe helyezik, amely stabilizálja a szöveteket a bomlás megelőzése érdekében . A leggyakoribb fixálószer a formalin (10% semleges pufferolt formaldehid vízben).
Felkészülés a szövettanra
A szövetet ezután mikroszkóp alatt előkészítjük megtekintésre akár kémiai rögzítéssel, akár fagyasztott metszettel.
Ha nagy mintát kapnak, pl. Sebészeti beavatkozásból, akkor egy patológus megvizsgálja a szövetmintát, és kiválasztja azt a részt, amely a legvalószínűbb, hogy hasznos és pontos diagnózist eredményez - ezt a részt eltávolítják vizsgálat céljából egy olyan eljárás során, amelyet általában úgy hívnak, hogy durva vagy feldarabolt. A nagyobb mintákat úgy vágják le, hogy anatómiai szerkezetüket helyesen helyezzék el a kazettában. Bizonyos minták (különösen biopsziák) elvégezhetők agar előbeágyazáson, hogy biztosítsák a megfelelő szöveti tájolást a kazettában, majd a blokkban és a diagnosztikai mikroszkópia tárgylemezen. Ezt a műanyag kazettába helyezik a folyamat további részében.
Kémiai rögzítés
A formalin mellett más kémiai rögzítőszereket is használtak. De az immunhisztokémiai (IHC) festés és a diagnosztikus molekuláris patológiás vizsgálatok megjelenésével ezeken a mintákon a formalin a standard kémiai fixálóvá vált az emberi diagnosztikai szövettanban. A nagyon kisméretű minták rögzítési ideje rövidebb, és a humán diagnosztikai kórszövettani szabványok léteznek.
Feldolgozás
A vizet a mintából egymást követő szakaszokban távolítják el növekvő koncentrációjú alkohol használatával . A xilolt az utolsó dehidratációs fázisban használják alkohol helyett - ez azért van, mert a következő lépésben használt viasz oldódik xilolban, ahol nincs alkoholban, lehetővé téve a viasz behatolását (beszivárgását) a mintába. Ez a folyamat általában automatizált, és egyik napról a másikra történik. A viaszba beszivárgott mintát ezután átviszik egy egyedi minta beágyazó (általában fém) tartályba. Végül olvadt viaszt vezetünk a mintába a tartályban, és megszilárdulásra hűtjük, hogy beágyazhassuk a viasztömbbe. Ez az eljárás szükséges ahhoz, hogy megfelelően orientált mintát nyújtsunk, amely elég erős ahhoz, hogy a tárgylemezhez vékony mikrotóm metszet (eke) t kapjunk.
Miután a viaszba ágyazott blokk elkészült, a szakaszokat levágják belőle, és általában vízfürdő felületre kell lebegni, amely szétteríti a részt. Ezt általában kézzel végzik, és szakképzett munka (hisztotechnológus), és a laboratórium személyzete dönt arról, hogy a mikrotóm viaszszalag minta mely részeit helyezze a diákra. Általában számos diát készítenek a blokk különböző szintjeiről. Ezt követően a vékony részre szerelt csúszda foltos, és védőburkolat van rajta. Gyakori foltok esetén általában automatikus eljárást használnak; de a ritkán használt foltokat gyakran kézzel végzik.
Fagyasztott szakaszok feldolgozása
A szövettani feldolgozás második módszerét fagyasztott szakaszfeldolgozásnak nevezik . Ez egy rendkívül technikai tudományos módszer, amelyet egy képzett kozmetikus végez. Ennél a módszernél a szövetet lefagyasztják és vékonyra szeletelik a fagyasztás alatti hűtőberendezésbe, a kriosztátba szerelt mikrotom segítségével . A vékony fagyasztott részeket üveglapra szerelik, azonnal és rövid ideig folyékony rögzítőben rögzítik, és hasonló festési technikákkal festik, mint a hagyományos viaszba ágyazott részeket. Ennek a módszernek az előnyei a gyors feldolgozási idő, kevesebb berendezésigény és kevesebb szellőzés a laboratóriumban. Hátránya a végső dia rossz minősége. A műtéten belüli patológiában használják olyan meghatározásokhoz, amelyek segíthetnek a műtét következő lépésének kiválasztásában az adott műtét során (például a tumor eltávolítási határának tisztaságának előzetes meghatározásához a műtét során).
A feldolgozott szövettani tárgylemezek festése
Ezt meg lehet tenni a vegyi rögzítéssel feldolgozott tárgylemezekre vagy a fagyasztott metszet tárgylemezekre. A szövet mikroszkóp alatt történő megtekintéséhez a metszeteket egy vagy több pigmenttel festjük . A festés célja a sejtek összetevőinek feltárása; kontrasztot használnak a kontraszt biztosítására.
A szövettanban leggyakrabban használt folt a hematoxilin és az eozin (gyakran rövidítve H&E) kombinációja . A hematoxilint a magok kék színű festésére használják , míg az eozin a citoplazmát és az extracelluláris kötőszöveti mátrixot rózsaszínre . Több száz különféle technikát alkalmaztak a sejtek szelektív festésére. A szövetmetszetek színezésére használt egyéb vegyületek közé tartozik a szafranin , az olajvörös O , a kongóvörös , az ezüstsók és a mesterséges festékek. A hisztokémia a laboratóriumi vegyszerek és a szöveten belüli komponensek közötti kémiai reakciók használatának tudományára utal. Egy általánosan használt hisztokémiai technika a Perls porosz kék reakciója, amelyet a vaslerakódások kimutatására használnak olyan betegségekben, mint a hemokromatózis .
A közelmúltban antitesteket használtak bizonyos fehérjék , lipidek és szénhidrátok festésére . Úgynevezett immunhisztokémia , ez a technika jelentősen nőtt a képesség, hogy pontosan azonosítsák kategóriái sejteket mikroszkóp alatt. Egyéb fejlett technikák közé tartozik az in situ hibridizáció a specifikus DNS- vagy RNS -molekulák azonosítására . Ezek az ellenanyag -festési módszerek gyakran fagyasztott metszet -szövettani alkalmazást igényelnek. Ezeket a fenti eljárásokat a laboratóriumban, képzett speciális laboratóriumi tudós (szövettudós) ellenőrzése és pontossága mellett is elvégzi. A digitális fényképezőgépeket egyre gyakrabban használják szövettani képek készítésére.
Értelmezés
A szövettani tárgylemezeket mikroszkóp alatt megvizsgálja egy patológus , egy orvos által képzett szakember, aki elvégezte az elismert képzési programot. Ez az orvosi diagnózis patológiai jelentésként van megfogalmazva, amely leírja a szövettani eredményeket és a patológus véleményét. Abban az esetben, rák , ez képviseli a szöveti diagnózis szükséges a legtöbb kezelési protokollok. A rák eltávolításában a patológus jelzi, hogy a műtéti szegély kitisztult -e , vagy érintett -e (a maradék rák lemaradt). Ezt vagy a kenyérsütés vagy a CCPDMA feldolgozási módszerrel végezzük. A mikroszkópos vizuális műtermékek potenciálisan téves diagnózist okozhatnak a mintákban.
Miokardiális infarktusban
Miután egy miokardiális infarktus (szívroham), nem kórszövettani látható az első ~ 30 perc. Az egyetlen lehetséges jel az első 4 órában a szálak hullámossága a határon. Később azonban koagulációs nekrózis kezdődik, ödémával és vérzéssel. 12 óra elteltével a myocyták karyopyknosisát és hypereosinophilia -ját lehet látni a kontrakciós sáv nekrózisával a széleken, valamint a neutrofil infiltráció kezdetét. 1-3 nap múlva folytatódik a koagulációs nekrózis, magok és csíkok elvesztésével, valamint a neutrofilek fokozott beszűrődésével az interstitiumba. Az infarktus utáni első hét végéig elkezdődik az elhalt izomrostok szétesése, a neutrofilek nekrózisa és az elhalt sejtek makrofágok eltávolítása a határon, ami növeli a következő napokat. Egy hét elteltével megkezdődik a granulációs szövetek képződése is a szegélyeknél, amely a következő hónapban érlelődik, és fokozott kollagénlerakódást és csökkent sejtességet kap, amíg a szívizom hegesedése teljesen be nem ér , körülbelül 2 hónappal az infarktus után.
Lásd még
- Anatómiai patológia
- Molekuláris patológia
- Fagyasztott szakasz eljárás
- Orvostechnológus
- Lézeres rögzítés mikrodiszekció
- A patológusok listája
Hivatkozások
Külső linkek
- Virtuális szövettanfolyam - Zürichi Egyetem (német, angol verzió előkészítés alatt)
- A méhnyak hisztopatológiája - digitális atlasz (IARC szűrőcsoport)
- Szövettani patológia Virtual Slidebox - Iowai Egyetem