Teljes vérkép - Complete blood count

Teljes vérkép
CBC minta a nyomtatás előtt, amely CBC és differenciális eredményeket mutat
Szinonimák	Teljes vérsejtszám, teljes vérkép (FBC), teljes vérsejtszám, teljes vérvizsgálat (FBE), vérkép
Háló	D001772
MedlinePlus	003642
LOINC	CBC kódok , pl. 57021-8
HCPCS-L2	G0306

A teljes vérkép ( CBC ), más néven teljes vérkép ( FBC ), orvosi laboratóriumi tesztek összessége , amelyek információt nyújtanak az ember vérében lévő sejtekről . A CBC jelzi a fehérvérsejtek , vörösvértestek és vérlemezkék számát , a hemoglobin koncentrációját és a hematokritet (a vörösvértestek térfogatszázalékát). A vörösvértestek indexeit is , amelyek a vörösvértestek átlagos méretét és hemoglobin -tartalmát jelzik, szintén jelentik, és beletartozhat a fehérvérsejtek differenciálódása is , amely a különböző típusú fehérvérsejteket számolja.

A CBC -t gyakran orvosi értékelés részeként végzik, és felhasználhatók az egészség nyomon követésére vagy a betegségek diagnosztizálására. Az eredményeket úgy értelmezik, hogy összehasonlítják őket referenciatartományokkal , amelyek nemtől és életkortól függően változnak. Az olyan állapotokat, mint az anémia és a thrombocytopenia, a kóros teljes vérkép eredményei határozzák meg. A vörösvértestek mutatói információt nyújthatnak a személy vérszegénységének okairól, például a vashiányról és a B12 -vitamin -hiányról , a fehérvérsejt -differenciál eredménye pedig segíthet diagnosztizálni a vírusos , bakteriális és parazitafertőzéseket, valamint a vérbetegségeket, például a leukémiát . Nem minden, a referenciatartományon kívül eső eredmény orvosi beavatkozást igényel.

A CBC -t alapvető laboratóriumi berendezések vagy automatizált hematológiai analizátor segítségével végzik , amely megszámolja a sejteket, és információkat gyűjt azok méretéről és szerkezetéről. A hemoglobin koncentrációját mérik, és a vörösvértestek indexét a vörösvértestek és a hemoglobin méréseiből számítják ki. Manuális tesztek alkalmazhatók a kóros eredmények független megerősítésére. A minták körülbelül 10–25% -a kézi vérkenet -vizsgálatot igényel , amelyben a vért megfestik és mikroszkóp alatt nézik annak ellenőrzése érdekében, hogy az elemző eredményei összhangban vannak -e a sejtek megjelenésével, és hogy rendellenességeket keresnek. A hematokrit manuálisan meghatározható a minta centrifugálásával és a vörösvértestek arányának mérésével, és olyan laboratóriumokban, ahol nincs hozzáférés automatizált műszerekhez, a vérsejteket mikroszkóp alatt hemocitométerrel számolják .

1852 -ben Karl Vierordt közzétette az első eljárást a vérvétel elvégzésére, amelynek során ismert mennyiségű vért szétterítettek a mikroszkóp tárgylemezén, és minden sejtet megszámoltak. A hemocitométer 1874-es feltalálása, Louis-Charles Malassez, leegyszerűsítette a vérsejtek mikroszkópos elemzését, és a 19. század végén Paul Ehrlich és Dmitri Leonidovich Romanowsky kifejlesztett technikákat a fehér és vörösvérsejtek festésére, amelyeket még mindig használnak a vérkenetek vizsgálatára . Az 1920 -as években kifejlesztettek automatizált módszereket a hemoglobin mérésére, és Maxwell Wintrobe 1929 -ben bevezette a Wintrobe hematokrit módszert, amely lehetővé tette számára a vörösvértestek indexének meghatározását. A vérsejtszámok automatizálásának mérföldköve volt a Coulter -elv , amelyet Wallace H. Coulter szabadalmaztatott 1953 -ban. A Coulter -elv elektromos impedancia méréseket használ a vérsejtek számlálásához és méretük meghatározásához; ez egy olyan technológia, amelyet sok automatizált elemzőben továbbra is használnak. Az 1970 -es években a további kutatások során optikai méréseket végeztek a sejtek számolására és azonosítására, ami lehetővé tette a fehérvérsejt -differenciálódás automatizálását.

Célja

A sejtek és a vérlemezkék az emberi vérben. A vörösvérsejtek , amelyek oxigént szállítanak, túlsúlyban vannak, és a vér színét idézik elő. A fehérvérsejtek az immunrendszer részei . A vérlemezkékre szükség van a vérrögök képződéséhez , amelyek megakadályozzák a túlzott vérzést.

A vér folyékony részből áll, amelyet plazmának neveznek , és egy sejtrészből, amely vörösvértesteket , fehérvérsejteket és vérlemezkéket tartalmaz . A teljes vérkép értékeli a vér három sejtkomponensét. Bizonyos egészségügyi állapotokat, például vérszegénységet vagy thrombocytopeniát a vérsejtek számának jelentős növekedése vagy csökkenése határoz meg. Sok szervrendszerben bekövetkezett változások befolyásolhatják a vért, ezért a CBC eredmények hasznosak a betegségek széles körének vizsgálatához. A rendelkezésre álló információmennyiség miatt a teljes vérkép az egyik leggyakrabban elvégzett orvosi laboratóriumi vizsgálat.

A CBC -t gyakran használják betegségek szűrésére orvosi értékelés részeként. Ez akkor is szükséges, ha az egészségügyi szolgáltató gyanítja, hogy egy személynek olyan betegsége van, amely hatással van a vérsejtekre, például fertőzés , vérzési rendellenesség vagy egyes rákos megbetegedések . Azoknál az embereknél, akiknél olyan rendellenességeket diagnosztizáltak, amelyek kóros CBC -eredményeket okozhatnak, vagy olyan kezelésben részesülnek, amely befolyásolhatja a vérsejtszámot, rendszeres CBC -t végezhetnek, hogy figyelemmel kísérjék egészségüket, és a vizsgálatot gyakran minden nap elvégzik a kórházban lévő embereken. Az eredmények utalhatnak vér- vagy vérlemezke -transzfúzió szükségességére .

A teljes vérképnek számos orvosi területen speciális alkalmazása van . Gyakran elvégzik, mielőtt egy személyt műtéten vetnek át, hogy kimutassák a vérszegénységet, biztosítsák, hogy a vérlemezkék szintje elegendő, és szűrjék a fertőzést, valamint a műtét után, hogy ellenőrizni lehessen a vérveszteséget . A sürgősségi orvostudományban a CBC -t számos tünet, például láz , hasi fájdalom és légszomj , valamint a vérzés és a trauma felmérésére használják . A vérképet szorosan figyelemmel kísérik azoknál az embereknél, akik kemoterápiát vagy sugárkezelést kapnak a rák miatt, mivel ezek a kezelések elnyomják a vérsejtek termelését a csontvelőben, és súlyosan alacsony fehérvérsejtszámot, vérlemezkéket és hemoglobint termelhetnek . Rendszeres CBC-re van szükség azoknak az embereknek, akik bizonyos pszichiátriai gyógyszereket , például klozapint és karbamazepint szednek , amelyek ritka esetekben életveszélyes fehérvérsejtszám-csökkenést ( agranulocitózist ) okozhatnak . Mivel a terhesség alatti vérszegénység rosszabb kimeneteleket eredményezhet az anya és gyermeke számára, a teljes vérkép a prenatális ellátás rutin része ; és újszülött csecsemőknél CBC -re lehet szükség a sárgaság kivizsgálásához vagy az éretlen sejtek számának számításához a fehérvérsejt -differenciálban , ami a szepszis mutatója lehet .

A teljes vérkép a hematológia alapvető eszköze , amely a vérrel kapcsolatos betegségek okának, prognózisának, kezelésének és megelőzésének vizsgálatát végzi. A CBC és a kenetvizsgálat eredményei tükrözik a hematopoietikus rendszer működését - a vérsejtek, különösen a csontvelő termelésében és fejlődésében részt vevő szerveket és szöveteket . Például mindhárom sejttípus alacsony száma ( pancytopenia ) jelezheti, hogy a vérsejtek termelését csontvelő -rendellenesség befolyásolja, és a csontvelő -vizsgálat tovább vizsgálhatja az okot. A kóros sejtek a vérkeneten akut leukémiára vagy limfómára utalhatnak , míg a kórosan magas neutrofilek vagy limfociták száma az indikatív tünetekkel és a vérkenettel kapcsolatos megállapításokkal együtt mieloproliferatív rendellenesség vagy limfoproliferatív rendellenesség gyanúját vetheti fel . A CBC eredmények és a vérkenet vizsgálata segíthet megkülönböztetni a vérszegénység okait, például a táplálkozási hiányosságokat , a csontvelő -rendellenességeket , a szerzett hemolitikus anémiákat és az öröklött állapotokat, mint a sarlósejtes vérszegénység és a talaszémia .

A teljes vérkép referenciatartományai a látszólag egészséges emberek 95% -ánál talált eredmények tartományát jelentik. Értelemszerűen az eredmények 5% -a mindig kívül esik ezen a tartományon, így egyes kóros eredmények inkább a természetes eltéréseket tükrözik, mintsem egészségügyi problémát jeleznek. Ez különösen akkor valószínű, ha az ilyen eredmények csak kismértékben vannak a referenciatartományon kívül, ha összhangban vannak a korábbi eredményekkel, vagy ha nincs más kapcsolódó rendellenesség, amelyet a CBC mutat. Ha a vizsgálatot viszonylag egészséges populáción végzik, a klinikailag jelentéktelen eltérések száma meghaladhatja a betegséget jelző eredmények számát. Ezért az Egyesült Államokban, az Egyesült Királyságban és Kanadában működő szakmai szervezetek azt javasolják, hogy ne végezzenek műtét előtti CBC-vizsgálatot alacsony kockázatú műtéteknél olyan személyeknél, akiknek nincs megfelelő egészségügyi állapotuk. Az ismételt vérvétel a kórházi betegek hematológiai vizsgálatához hozzájárulhat a kórházban szerzett vérszegénységhez, és szükségtelen vérátömlesztéshez vezethet.

Eljárás

Média lejátszása

A CBC-t ujjbegy módszerrel, Abbott Cell-Dyn 1700 automatizált analizátorral végezték

A mintát úgy veszik, hogy vért szívnak egy csőbe, amely egy véralvadásgátlót - tipikusan EDTA -t - tartalmaz, hogy megakadályozza annak természetes alvadását . A vért általában venni a véna , de ha ez nehéz lehet gyűjteni kapillárisok által ujjbegyből , vagy egy heelprick a csecsemőnél. A vizsgálatot általában automatizált analizátoron végzik, de kézi technikák, például vérkenet -vizsgálat vagy manuális hematokrit -teszt használhatók a kóros eredmények vizsgálatára. A sejtszámlálást és a hemoglobin mérést manuálisan végzik olyan laboratóriumokban, amelyek nem rendelkeznek hozzáféréssel az automatizált műszerekhez.

Automatizált

Az analizátor fedélzetén a mintát fel kell keverni, hogy egyenletesen eloszlassa a sejteket, majd hígítják és legalább két csatornára osztják, amelyek közül az egyiket a vörösvérsejtek és a vérlemezkék, a másikat a fehérvérsejtek és a hemoglobin koncentráció meghatározására használják. . Egyes műszerek külön csatornán mérik a hemoglobint, és további csatornák használhatók a fehérvérsejtek differenciálszámának, a retikulociták számának és a vérlemezkék speciális mérésének elvégzésére. A sejteket folyadékáramban szuszpendáljuk, és tulajdonságaikat mérjük, amikor áramolnak a szenzorok mellett egy áramlási citometria néven ismert technikával . Hidrodinamikai fókuszálással lehet izolálni az egyes sejteket, így pontosabb eredményeket lehet elérni: a hígított mintát alacsony nyomású folyadékáramba fecskendezik, ami a minta sejtjeit egyetlen reszelésben sorakoztatja fel a lamináris áramláson keresztül .

Sysmex XT-4000i automatizált hematológiai elemző

A Coulter -elv - az átmeneti áramcsökkenés arányos a részecskék térfogatával

A hemoglobin koncentrációjának méréséhez reagens vegyszert adnak a mintához, hogy elpusztítsák ( lizálják ) a vörösvértesteket a vörösvértestek számától eltérő csatornában. Azon analizátorokon, amelyek a fehérvérsejtszámot ugyanazon a csatornán végzik, mint a hemoglobin mérését, ez lehetővé teszi a fehérvérsejtek könnyebb számolását. A hematológiai elemzők spektrofotometriával mérik a hemoglobint, és a fényabszorbancia és a jelen lévő hemoglobin mennyisége közötti lineáris kapcsolaton alapulnak . Vegyi anyagokat használnak a hemoglobin különböző formáinak, például az oxihemoglobin és a karboxihemoglobin egy stabil formává, általában ciánmethemoglobinná történő átalakítására , és állandó színváltozás létrehozására. A kapott szín abszorbanciája meghatározott hullámhosszon - általában 540 nanométer - mérve megfelel a hemoglobin koncentrációjának.

Az érzékelők két fő elv alapján számolják és azonosítják a mintában lévő cellákat: elektromos impedancia és fényszórás . Az impedancia-alapú cellaszámlálás a Coulter-elv szerint működik : a cellákat elektromos áramot hordozó folyadékban függesztik fel , és amint kis nyíláson (nyíláson) áthaladnak, gyenge elektromos vezetőképességük miatt áramcsökkenést okoznak . A amplitúdója a feszültség impulzus, mint egy sejt áthalad a nyíláson korrelál a folyadék mennyisége által kiszorított a sejt, és így a sejt térfogata, míg az összes impulzusok száma korrelál a sejtek száma a mintában. A sejttérfogatok eloszlását hisztogramon ábrázoljuk , és az egyes sejttípusok tipikus mérete alapján a térfogatküszöbök beállításával a különböző sejtpopulációk azonosíthatók és megszámolhatók.

A fényszórási technikákban a lézer vagy a volfrám-halogénlámpa fényét a sejtek áramára irányítják, hogy információkat gyűjtsenek méretükről és szerkezetükről. A sejtek különböző szögben szórják a fényt, amikor áthaladnak a nyalán, amelyet fotométerek segítségével észlelnek . Az előremenő szóródást, amely a sugár tengelye mentén szórt fény mennyiségére vonatkozik, elsősorban a fény diffrakciója okozza, és korrelál a sejtmérettel, míg az oldalsó szóródást (a fény 90 fokos szögben szóródik) a visszaverődés és a törés okozza, és információ a sejtek összetettségéről.

Rádiófrekvencián alapuló módszerek alkalmazhatók impedanciával kombinálva. Ezek a technikák ugyanazon az elven működnek, mint az áram megszakadásának mérése, amikor a sejtek egy nyíláson áthaladnak, de mivel a nagyfrekvenciás RF áram behatol a sejtekbe, a kapott impulzus amplitúdója olyan tényezőkhöz kapcsolódik, mint a mag relatív mérete , a mag szerkezete és a citoplazmában lévő granulátum mennyisége . A vérlemezkékhez hasonló méretű vörösvértestek és sejttörmelékek zavarhatják a vérlemezkeszámot, és a nagy vérlemezkéket nem lehet pontosan megszámolni, ezért egyes elemzők további technikákat alkalmaznak a vérlemezkék mérésére, például fluoreszkáló festést, többszöges fényt szórás és monoklonális antitest jelölés.

A legtöbb analizátor közvetlenül méri a vörösvértestek átlagos méretét, amelyet átlagos sejtmennyiségnek (MCV) neveznek , és kiszámítja a hematokritet úgy, hogy megszorozza a vörösvértestek számát az MCV -vel. Néhányan a hematokritet úgy mérik, hogy összehasonlítják a vörösvértestek teljes térfogatát a vérmintával, és az MCV -t a hematokrit és a vörösvértestek számából származtatják. A hemoglobin -koncentrációt, a vörösvérsejtszámot és a hematokritet használják az egyes vörösvérsejteken belüli átlagos hemoglobinmennyiség, az átlagos korpuszkuláris hemoglobin (MCH) kiszámítására ; és koncentrációja, az átlagos korpuszkuláris hemoglobin -koncentráció (MCHC). Egy másik számítás, a vörösvértestek eloszlási szélessége (RDW) az átlagos sejt térfogatának szórásából származik, és a sejtek méretének változását tükrözi.

Példa egy fehérvérsejt -differenciális szórásgramra: a különböző színű klaszterek különböző sejtpopulációkat jeleznek

Reagensekkel való kezelés után a fehérvérsejtek három különböző csúcsot képeznek, amikor térfogatukat hisztogramon ábrázolják. Ezek a csúcsok nagyjából megfelelnek a granulociták , limfociták és más mononukleáris sejtek populációinak , lehetővé téve a háromrészes differenciálást, csak a sejttérfogat alapján. A fejlettebb elemzők további technikákat használnak az öt-hét részes differenciál biztosítására, például fényszórást vagy rádiófrekvenciás elemzést, vagy festékeket használnak bizonyos vegyi anyagok festésére a sejtekben- például nukleinsavakat , amelyek magasabb koncentrációban találhatók az éretlen sejtekben vagy mieloperoxidáz , a mieloid törzs sejtjeiben található enzim . A bazofileket külön csatornában lehet számolni, ahol a reagens elpusztítja a többi fehérvérsejtet, és a bazofileket érintetlenül hagyja. Az ezekből a mérésekből összegyűjtött adatokat elemzik és scattergramon ábrázolják , ahol klasztereket képeznek, amelyek korrelálnak az egyes fehérvérsejt -típusokkal. A differenciálszámlálás automatizálásának másik módja a digitális mikroszkópos szoftver használata, amely mesterséges intelligenciát használ a fehérvérsejtek osztályozására a vérkenet fotomikrográfiájából . A cellaképeket egy emberi kezelő jeleníti meg, aki szükség esetén manuálisan újraosztályozhatja a cellákat.

A legtöbb elemző kevesebb, mint egy percet vesz igénybe a teljes vérkép összes vizsgálatának elvégzéséhez. Mivel az elemzők sok egyedi sejtből vesznek mintát és számolnak, az eredmények nagyon pontosak. Előfordulhat azonban, hogy egyes rendellenes sejteket nem lehet helyesen azonosítani, ezért a műszer eredményeinek kézi felülvizsgálatát és a rendellenes sejtek más módon történő azonosítását igénylik, amelyeket a műszer nem tudott kategorizálni.

Gondozási pont tesztelése

A gondozási ponton végzett vizsgálatok a laboratóriumi környezeten kívül végzett vizsgálatokra vonatkoznak, például egy személy ágyánál vagy klinikán. Ez a tesztelési módszer gyorsabb és kevesebb vért használ, mint a hagyományos módszerek, és nem igényel speciálisan képzett személyzetet, ezért vészhelyzetekben és az erőforrásokhoz való korlátozott hozzáférésű területeken hasznos. A gondozási hely hematológiai vizsgálatához gyakran használt eszközök közé tartozik a HemoCue , egy hordozható analizátor, amely spektrofotometriával méri a minta hemoglobin-koncentrációját, és az i-STAT , amely a vörösvértestek koncentrációjának becslésével levezeti a hemoglobin leolvasását. a vér vezetőképessége. Hemoglobin és hematokrit mérhető point-of-care tervezett eszközök vérgáz vizsgálat , de ezek a mérések néha kevéssé korrelál révén szerzett standard módszerekkel. Vannak a klinikákon történő használatra tervezett hematológiai elemzők egyszerűsített változatai, amelyek teljes vérképet és differenciálást tudnak biztosítani.

Kézikönyv

A hematokrit kézi meghatározása. A vért centrifugáltuk, vörösvértestekre és plazmára osztva.

A vizsgálatok manuálisan is elvégezhetők, ha nem állnak rendelkezésre automatizált berendezések, vagy ha az elemző eredményei azt jelzik, hogy további vizsgálatra van szükség. Az automatizált eredményeket az esetek 10–25% -ában jelzik a kézi vérkenet -ellenőrzéshez, ami oka lehet az abnormális sejtpopulációknak, amelyeket az analizátor nem tud megfelelően számolni, vagy az elemző által generált belső zászlóknak, amelyek azt sugallják, hogy az eredmények pontatlanok lehetnek, vagy számszerű eredményeket küszöbön kívül esnek. Ezeknek a problémáknak a vizsgálatához a vért mikroszkóp tárgylemezre terítik, Romanowsky -foltra festik , és mikroszkóp alatt vizsgálják . A vörös- és fehérvérsejtek és a vérlemezkék megjelenését értékelik, és minőségi eltéréseket jelentenek, ha vannak. A vörösvértestek megjelenésében bekövetkező változásoknak jelentős diagnosztikai jelentősége lehet - például a sarlósejtek jelenléte sarlósejtes betegségre utal , és a töredezett vörösvértestek ( skisztociták ) nagy száma sürgős kivizsgálást igényel, mivel mikroangiopátiás hemolitikus anaemia . Bizonyos gyulladásos állapotokban és paraprotein rendellenességekben, mint a myeloma multiplex , a magas fehérjeszint a vérben vörösvérsejtek megjelenését okozhatja a keneten, amelyet rouleaux -nak neveznek . Bizonyos parazita betegségek , mint például a malária és a babeziosis kimutathatók a kórokozó szervezetek megtalálásával a vérkeneten, a vérlemezkeszám pedig megbecsülhető a vérkenetből, ami hasznos, ha az automatizált vérlemezkeszám pontatlan.

A kézi fehérvérsejt -differenciálás elvégzéséhez a mikroszkopikus 100 sejtet számlál a vérkeneten, és megjelenésük alapján osztályozza őket; néha 200 sejtet számolnak. Ez megadja az egyes fehérvérsejt -típusok százalékos arányát, és ha ezeket a százalékokat megszorozzuk a fehérvérsejtek teljes számával, megkaphatjuk az egyes fehérvérsejt -típusok abszolút számát. A kézi számlálás mintavételi hibának van kitéve, mert olyan kevés sejtet számolnak össze az automatizált elemzéshez képest, de olyan rendellenes sejteket tud azonosítani, amelyeket az elemzők nem tudnak, például az akut leukémiában észlelt robbanássejteket . A fehérvérsejtek mikroszkópos vizsgálatából olyan klinikailag jelentős tulajdonságok is megállapíthatók, mint a toxikus granulálás és a vakuoláció .

A hematokrit manuálisan is elvégezhető, ha egy kapilláris csövet vérrel töltenek meg, centrifugálják, és megmérik a vörösvérsejtekből álló vér százalékos arányát. Ez hasznos lehet bizonyos körülmények között, amelyek miatt az automatizált hematokrit -eredmények helytelenek lehetnek, például policitémia (erősen megnövekedett vörösvértest -szám) vagy súlyos leukocitózis (erősen emelkedett fehérvérsejtszám, amely fehérvérsejteket okozva megzavarja a vörösvértestek mérését) vörösvértesteknek számítanak).

Balra: módosított Fuchs-Rosenthal hemocitométer . Jobbra: Kilátás a hemocitométer mikroszkópján keresztül. A beépített rács segít nyomon követni, hogy mely cellákat számolták meg.

A vörös- és fehérvérsejteket és a vérlemezkéket hemocitométerrel , mikroszkóp tárgylemezzel lehet megszámolni egy meghatározott térfogatú hígított vért tartalmazó kamrával. A hemocitométer kamráját kalibrált rácsmal maratják, hogy segítse a sejtszámlálást. A rácsban látható sejteket megszámoljuk és elosztjuk a vizsgált vér térfogatával, amelyet a rácson számított négyzetek számából határozunk meg, hogy megkapjuk a mintában lévő sejtek koncentrációját. A kézi sejtszámlálás munkaigényes és pontatlan az automatizált módszerekhez képest, ezért ritkán használják, kivéve olyan laboratóriumokban, amelyek nem férnek hozzá az automatizált elemzőkhöz. A fehérvérsejtek megszámlálásához a mintát olyan folyadékkal hígítjuk, amely vörösvértesteket lizáló vegyületet, például ammónium -oxalátot , ecetsavat vagy sósavat tartalmaz . Néha foltot adnak a hígítóhoz, amely kiemeli a fehérvérsejtek magjait, megkönnyítve azok azonosítását. A vérlemezkék kézi számlálását hasonló módon végzik, bár egyes módszerek érintetlenül hagyják a vörösvértesteket. Egy fáziskontraszt-mikroszkóp helyett fénymikroszkóp , lehet, hogy a vérlemezkék könnyebb azonosítani. A manuális vörösvérsejtszámot ritkán végzik, mivel pontatlan, és más módszerek, például a hemoglobinometria és a manuális hematokrit állnak rendelkezésre a vörösvértestek értékelésére; de ha szükséges, a vörösvértesteket meg lehet számolni a sóoldattal hígított vérben.

A hemoglobin kézzel mérhető spektrofotométerrel vagy koloriméterrel . A hemoglobin kézi méréséhez a mintát hígítjuk reagensekkel, amelyek elpusztítják a vörösvértesteket a hemoglobin felszabadítása érdekében. Más vegyi anyagokat használnak a különböző típusú hemoglobinok egy formává alakítására, lehetővé téve annak könnyű mérését. Az oldatot ezután mérő küvettába helyezzük, és az abszorbanciát meghatározott hullámhosszon mérjük, amely az alkalmazott reagens típusától függ. Az abszorbancia és a hemoglobin -koncentráció közötti kapcsolat meghatározásához egy ismert mennyiségű hemoglobint tartalmazó referencia -standardot használnak, amely lehetővé teszi a minta hemoglobinszintjének mérését.

A vidéki és gazdaságilag hátrányos helyzetű térségekben a rendelkezésre álló teszteket a berendezésekhez és a személyzethez való hozzáférés korlátozza. Abban az alapellátás létesítmények ezekben a régiókban, vizsgálatok korlátozni lehet vizsgálata vörösvérsejt morfológiáját és kézi mérése hemoglobin, míg bonyolultabb technikák, mint a kézi sejtszám és differenciálművek, és néha automatizált sejtszám, elvégezett kerület laboratóriumokban. A regionális és tartományi kórházak és tudományos központok általában hozzáférnek az automatizált elemzőkhöz. Ahol laboratóriumi létesítmények nem állnak rendelkezésre, a hemoglobin -koncentráció becslését úgy kaphatjuk meg, hogy egy csepp vért teszünk egy szabványos típusú abszorbens papírra, és összehasonlítjuk egy színskálával.

Minőség ellenőrzés

Az automatizált analizátorokat rendszeresen kalibrálni kell . A legtöbb gyártó meghatározott paraméterekkel látja el a tartósított vért, és az elemzőket beállítják, ha az eredmények a meghatározott küszöbértékeken kívül esnek. Annak érdekében, hogy az eredmények továbbra is pontosak legyenek, a minőségi ellenőrző mintákat, amelyeket általában a műszergyártó biztosít, naponta legalább egyszer megvizsgálnak. A mintákat úgy állítják össze, hogy konkrét eredményeket biztosítsanak, és a laboratóriumok összehasonlítják eredményeiket az ismert értékekkel, hogy biztosítsák a műszer megfelelő működését. Azoknál a laboratóriumoknál, amelyek nem férnek hozzá a kereskedelmi minőségellenőrzési anyagokhoz, az indiai szabályozó szervezet azt javasolja, hogy a páciens mintákat futtassa két példányban, és hasonlítsa össze az eredményeket. További minőségellenőrzési technikaként használható egy mozgóátlag -mérés, amelyben a betegminták átlagos eredményeit meghatározott időközönként mérik. Feltételezve, hogy a betegpopuláció jellemzői nagyjából változatlanok maradnak az idő múlásával, az átlagnak állandónak kell maradnia; az átlagos érték nagy eltolódása műszerproblémákat jelezhet. Az MCHC értékek különösen hasznosak ebből a szempontból.

A laboratóriumok a belső minőségellenőrzési minták ismert eredményekkel történő elemzése mellett külső minőségértékelő mintákat is kaphatnak a szabályozó szervezetektől. Míg a belső minőségellenőrzés célja annak biztosítása, hogy az analizátor eredményei reprodukálhatók legyenek egy adott laboratóriumon belül, a külső minőségértékelés ellenőrzi, hogy a különböző laboratóriumok eredményei összhangban vannak -e egymással és a célértékekkel. A külső minőségértékelő minták várható eredményeit nem hozzák nyilvánosságra a laboratóriumnak. A külső minőségértékelő programokat széles körben elfogadták Észak -Amerikában és Nyugat -Európában, és az akkreditáció fenntartása érdekében gyakran laboratóriumoknak kell részt venniük ezekben a programokban . A logisztikai problémák megnehezíthetik az alulfinanszírozott területek laboratóriumai számára a külső minőségértékelési rendszerek végrehajtását.

Tartalmazza a teszteket

A CBC méri a vérlemezkék és a vörös- és fehérvérsejtek mennyiségét, valamint a hemoglobin és a hematokrit értékeket. A vörösvértestek indexeit - MCV, MCH és MCHC -, amelyek leírják a vörösvértestek méretét és hemoglobin tartalmát, a vörösvértestek eloszlási szélességével (RDW) együtt jelentik, amely a vörösvértestek méretének ingadozását méri. sejtek. El lehet végezni a fehérvérsejtek differenciálódását, amely felsorolja a különböző típusú fehérvérsejteket, és néha az éretlen vörösvérsejtek (retikulociták) számát is figyelembe veszik.

Vörösvértestek, hemoglobin és hematokrit

A vörösvértestek oxigént szállítanak a tüdőből a szövetekbe, majd visszatérve a szén -dioxidot viszik vissza a tüdőbe, ahol kilégzik. Ezeket a funkciókat a sejtek hemoglobinja közvetíti. Az analizátor megszámolja a vörösvértesteket, az eredményt 10 ⁶ sejt /mikroliter vér (× 10 ⁶ /μL) vagy 10 ¹² sejt /liter (× 10 ¹² /L) egységben számolja be , és méri azok átlagos méretét, az ún. az átlagos sejttérfogat, és femtoliterekben vagy köbméterben kifejezve . Az átlagos sejtmennyiséget megszorozva a vörösvértestek számával, a hematokrit (HCT) vagy a csomagolt sejtek térfogata (PCV), a vörösvértestekből álló vér százalékos arányának mérése származtatható; és ha a hematokritet közvetlenül végzik, az átlagos sejtmennyiséget a hematokrit és a vörösvértestek számából lehet kiszámítani. A vörösvértestek lízise után mért hemoglobin szintjét általában gramm/liter (g/l) vagy gramm/deciliter (g/dL) mértékegységben kell megadni. Ha feltételezzük, hogy a vörösvértestek normálisak, akkor állandó kapcsolat van a hemoglobin és a hematokrit között: a hematokrit százalék körülbelül háromszorosa a g/dl -ben kifejezett hemoglobin értéknek, plusz vagy mínusz három. Ez a három szabálynak nevezett kapcsolat felhasználható annak megerősítésére, hogy a CBC eredmények helyesek.

A vörösvértestek számából, a hemoglobin -koncentrációból és a hematokritből két másik mérést is kiszámítanak: az átlagos korpuszkuláris hemoglobint és az átlagos korpuszkuláris hemoglobin -koncentrációt . Ezek a paraméterek leírják az egyes vörösvérsejtek hemoglobin tartalmát. Az MCH és az MCHC zavaró lehet; lényegében az MCH a vörösvértestekre jutó átlagos hemoglobin mennyiségét méri. Az MCHC megadja a sejt átlagos arányát, ami a hemoglobin. Az MCH nem veszi figyelembe a vörösvértestek méretét, míg az MCHC figyelembe veszi. Az MCV -t, az MCH -t és az MCHC -t együttesen vörösvértest -indexeknek nevezik . Ezen mutatók változása látható a vérkeneten: a kórosan nagy vagy kicsi vörösvérsejtek azonosíthatók a fehérvérsejtek méretéhez képest, és az alacsony hemoglobin -koncentrációjú sejtek sápadtnak tűnnek. Egy másik paramétert számítanak ki a vörösvértestek kezdeti méréseiből: a vörösvértestek eloszlási szélességét vagy az RDW -t, amely a sejtek méretének ingadozásának mértékét tükrözi.

Vérkenet egy vashiányos vérszegénységben szenvedő személytől , jellemző vörösvértest -morfológiával. A vörösvértestek rendellenesen kicsik ( mikrocitózis ), nagy kiterjedésűek a központi sápadtságukban ( hipokrómia ), és nagymértékben változnak ( anizocitózis ).

A kórosan alacsony hemoglobin, hematokrit vagy vörösvérsejtszám vérszegénységet jelez. A vérszegénység önmagában nem diagnózis, de arra utal, hogy a személy vörösvérsejtjeit befolyásolja. A vérszegénység általános okai közé tartozik a vérveszteség, a hibás vörösvértestek képződése (nem hatékony eritropoezis ), a vörösvértestek termelésének csökkenése (elégtelen eritropoezis) és a vörösvértestek fokozott pusztulása ( hemolitikus anémia ). Az anémia csökkenti a vér oxigénszállítási képességét, és olyan tüneteket okoz, mint a fáradtság és a légszomj. Ha a hemoglobin szintje a személy klinikai állapota alapján a küszöbérték alá csökken, vérátömlesztésre lehet szükség.

A vörösvértestek számának növekedését, ami általában a hemoglobin és a hematokrit növekedéséhez vezet, policitémiának nevezik . A kiszáradás vagy a diuretikumok alkalmazása "relatív" policitémiát okozhat, mivel csökkenti a plazma mennyiségét a vörösvértestekhez képest. A vörösvértestek számának valódi növekedése, amelyet abszolút policitémiának neveznek, akkor fordulhat elő, ha a szervezet több vörösvértestet termel, hogy kompenzálja a krónikusan alacsony oxigénszintet olyan körülmények között, mint a tüdő- vagy szívbetegség , vagy ha egy személy kórosan magas eritropoetinszinttel rendelkezik (EPO), a vörösvértestek termelését serkentő hormon. A polycythemia vera esetében a csontvelő vörösvértesteket és más vérsejteket termel túlzott mértékben.

A vörösvérsejt -indexek értékelése segít meghatározni a vérszegénység okát. Ha az MCV alacsony, a vérszegénységet mikrocitásnak nevezik , míg a magas MCV -vel rendelkező vérszegénységet makrocita anémiának . Az alacsony MCHC -vel rendelkező vérszegénységet hipokróm anaemiának nevezik . Ha vérszegénység jelen van, de a vörös vérsejt indexek normális, a vérszegénység tekinthető normochrom és normocitás . A hyperchromia kifejezést, amely magas MCHC -re utal, általában nem használják. Az MCHC emelkedése a felső referenciaérték felett ritka, főként olyan körülmények között fordul elő, mint a szferocitózis , a sarlósejtes betegség és a hemoglobin -C betegség . Az emelkedett MCHC is lehet hamis eredményt feltételek, mint a vörös vérsejt agglutinációs (ami hamis csökkenését a vörös vérsejtek száma, megemelve a MCHC) vagy erősen megemelt mennyiségű lipidek a vérben (ami hamis növekedését hemoglobin eredmény).

A mikrocitás anaemia jellemzően vashiánnyal, thalassémiával és krónikus betegségek vérszegénységével , míg a macrocytás anaemia alkoholizmussal , folsav- és B12 -hiányjal , egyes gyógyszerek alkalmazásával és néhány csontvelőbetegséggel társul . Az akut vérveszteség, hemolitikus anémia, csontvelő -rendellenességek és különféle krónikus betegségek normocita vérképes vérszegénységet eredményezhetnek. Az MCV további célt szolgál a laboratóriumi minőségellenőrzésben. Idővel viszonylag stabil a többi CBC paraméterhez képest, ezért az MCV nagy változása azt jelezheti, hogy a mintát rossz betegből vették.

Az alacsony RDW -nek nincs klinikai jelentősége, de az emelkedett RDW a vörösvértestek méretének megnövekedett eltérését jelenti, ami anizocitózis néven ismert állapot . Az anizocitózis gyakori a táplálkozási vérszegénységekben, például a vashiányos vérszegénységben és a B12 -vitamin vagy a folsavhiány miatti vérszegénységben, míg a thalassémiában szenvedők normális RDW -vel rendelkezhetnek. A CBC eredményei alapján további lépéseket lehet tenni a vérszegénység vizsgálatára, például ferritintesztel a vashiány jelenlétének megerősítésére, vagy hemoglobin elektroforézissel a hemoglobinopátia, például a talaszémia vagy a sarlósejtes betegség diagnosztizálására.

fehérvérsejtek

A fehérvérsejtek védekeznek a fertőzések ellen, és részt vesznek a gyulladásos válaszban . A magas fehérvérsejtszám, amelyet leukocitózisnak neveznek, gyakran fordul elő fertőzések, gyulladások és élettani stressz állapotok esetén . Ezt olyan betegségek is okozhatják, amelyek a vérsejtek kóros termelődésével járnak, például myeloproliferatív és limfoproliferatív rendellenességek . A csökkent fehérvérsejtszám, amelyet leukopéniának neveznek , fokozott fertőzésveszélyhez vezethet, és olyan kezelésekben fordul elő, mint a kemoterápia és a sugárterápia, valamint számos olyan állapot, amely gátolja a vérsejtek termelését. A szepszis mind leukocitózissal, mind leukopeniával jár. A teljes fehérvérsejt -számot általában sejtek per mikroliter vér ( /μL) vagy 10 ⁹ sejt /liter (× 10 ⁹ /L) értékben jelentik .

A fehérvérsejt -differenciálban a különböző típusú fehérvérsejteket azonosítják és megszámolják. Az eredményeket százalékban és abszolút számként kell megadni. Általában ötféle fehérvérsejtet - neutrofileket , limfocitákat , monocitákat , eozinofileket és bazofileket - mérnek. Egyes műszerek jelentik az éretlen granulociták számát, amely a neutrofilek prekurzoraiból álló osztályozás; különösen a promyelocyták , a myelocyták és a metamyelocyták . Más sejttípusokat jelentenek, ha azokat a manuális differenciálban azonosítják.

A differenciált eredmények hasznosak számos egészségügyi állapot diagnosztizálásában és megfigyelésében. Például a megnövekedett neutrofilszám ( neutrophilia ) bakteriális fertőzéssel, gyulladással és mieloproliferatív rendellenességekkel jár, míg csökkent szám ( neutropenia ) fordulhat elő azoknál az egyéneknél, akik kemoterápián vagy bizonyos gyógyszereket szednek, vagy akiknek csontvelő -betegségei vannak. . A neutropeniát bizonyos veleszületett rendellenességek is okozhatják, és gyermekeknél vírusos vagy bakteriális fertőzések után átmenetileg fordulhat elő. A súlyos neutropeniában és a fertőzés klinikai tüneteiben szenvedő embereket antibiotikumokkal kezelik a potenciálisan életveszélyes betegségek megelőzése érdekében.

Vérfilm krónikus myeloid leukémiában szenvedő személytől : sok éretlen és kóros fehérvérsejt látható.

A sávos neutrofilek - fiatal neutrofilek, amelyeknek nincs szegmentált magja - vagy az éretlen granulociták megnövekedett számát bal eltolódásnak nevezik, és szepszis és bizonyos vérbetegségek esetén fordul elő, de terhesség alatt normális. A megnövekedett limfocita -szám ( limfocitózis ) vírusfertőzéssel és limfoproliferatív rendellenességekkel, például krónikus limfocita leukémiával jár ; az emelkedett monocita -szám ( monocitózis ) krónikus gyulladásos állapotokkal jár; és az eozinofil szám gyakran emelkedik ( eozinofília ) parazita fertőzések és allergiás állapotok esetén. Megnövekedett számú bazofil, bazofília , előfordulhat myeloproliferatív rendellenességekben, mint például a krónikus myeloid leukémia és a policitémia. Bizonyos típusú kóros sejtek, például robbanássejtek vagy daganatos tulajdonságokkal rendelkező limfociták jelenléte hematológiai rosszindulatú daganatra utal .

Trombociták

Az esszenciális thrombocythemia vérfilmje . A vérlemezkék apró lila szerkezetek formájában láthatók.

A vérlemezkék alapvető szerepet játszanak a véralvadásban. Amikor egy véredény fala megsérül, a vérlemezkék a sérülés helyén tapadnak a szabad felülethez, és betömik a rést. A véralvadási kaszkád egyidejű aktiválása fibrin képződését eredményezi , amely megerősíti a vérlemezke dugót, hogy stabil alvadékot hozzon létre . Az alacsony vérlemezkeszám, trombocitopénia néven súlyos vérzést okozhat. Előfordulhat olyan egyéneknél, akik csontvelő -elnyomó kezelésben részesülnek, például kemoterápiában vagy sugárterápiában, vagy bizonyos gyógyszereket, például heparint szednek, amelyek az immunrendszert a vérlemezkék elpusztítására késztethetik. A thrombocytopenia számos vérbetegség, például akut leukémia és aplasztikus anaemia , valamint néhány autoimmun betegség jellemzője . Ha a vérlemezkeszám rendkívül alacsony, akkor vérlemezke -transzfúziót lehet végezni. A thrombocytosis , vagyis a magas vérlemezkeszám gyulladás vagy trauma esetén, valamint vashiányban fordulhat elő, és a thrombocytaszám kivételesen magas szintet érhet el az esszenciális thrombocythemia , ritka vérbetegségben szenvedők körében. A vérlemezkeszámot sejtegységekben /mikroliter vérben ( /μL), 10 ³ sejt /mikroliter (× 10 ³ /μL) vagy 10 ⁹ sejt /liter (× ¹⁰⁹ /l) -ban lehet megadni .

Az átlagos vérlemezke -térfogat (MPV) méri a vérlemezkék átlagos méretét femtoliterekben. Segíthet a thrombocytopenia okának meghatározásában; emelkedett MPV léphet fel, amikor fiatal vérlemezkéket bocsátanak a véráramba, hogy kompenzálják a vérlemezkék fokozott pusztulását, míg a csontvelő diszfunkciója miatt csökkent vérlemezkeszám -képződés alacsony MPV -t eredményezhet. Az MPV szintén hasznos a thrombocytopeniát okozó veleszületett betegségek megkülönböztetésében. Egyes elemzők jelentik az éretlen vérlemezke -frakciót (IPF) vagy a retikulált vérlemezkeszámot, és a vérben lévő éretlen vérlemezkék számának mérésével információt szolgáltat a vérlemezke -termelés sebességéről.

Egyéb tesztek

Retikulociták száma

Új metilénkékkel festett vörösvértestek : a sötétkék szerkezetet tartalmazó sejtek retikulociták.

A retikulociták éretlen vörösvértestek, amelyek az érett sejtekkel ellentétben RNS -t tartalmaznak . A retikulociták számát néha a teljes vérkép részeként végzik, általában egy személy vérszegénységének okának megvizsgálása vagy a kezelésre adott válasz értékelése céljából. A magas retikulocita -számmal rendelkező vérszegénység azt jelezheti, hogy a csontvelő nagyobb arányban termel vörösvértesteket a vérveszteség vagy a hemolízis ellensúlyozására, míg az alacsony retikulocitaszámú vérszegénység arra utalhat, hogy a személy olyan állapotban van, amely csökkenti a szervezet képességét vörösvértesteket termelnek. Amikor a táplálkozási vérszegénységben szenvedő emberek tápanyag -kiegészítést kapnak, a retikulociták számának növekedése azt jelzi, hogy szervezetük reagál a kezelésre, és több vörösvértestet termel. A hematológiai elemzők retikulocitaszámlálást végeznek azáltal, hogy a vörösvértesteket RNS -hez kötődő festékkel festik meg, és fényszórásos vagy fluoreszcens elemzéssel mérik a retikulociták számát. A vizsgálat manuálisan elvégezhető úgy, hogy a vért új metilénkékkel festik meg, és mikroszkóp alatt megszámolják az RNS -t tartalmazó vörösvértestek százalékos arányát. A retikulociták számát abszolút számként vagy a vörösvértestek százalékában fejezik ki.

Egyes műszerek az egyes retikulociták átlagos hemoglobin mennyiségét mérik; olyan paraméter, amelyet a vashiány mutatójaként vizsgáltak azoknál az embereknél, akiknek a feltételei zavarják a szokásos vizsgálatokat. Az éretlen retikulocita frakció (IRF) egy másik mérés, amelyet egyes elemzők végeznek, és amely számszerűsíti a retikulociták érettségét: a kevésbé érett sejtek több RNS -t tartalmaznak, és így erősebb fluoreszkáló jelet állítanak elő. Ez az információ hasznos lehet a vérszegénység diagnosztizálásában és a vérszegénység kezelését vagy csontvelő -transzplantációt követő vörösvértest -termelés értékelésében .

Nukleáris vörösvértestek

A csontvelőben, valamint a magzatban a májban és a lépben kialakuló vörösvértestek egy sejtmagot tartalmaznak, ami általában hiányzik a véráramban keringő érett sejtekben. Amikor észlelik, a magvörös vörösvérsejtek jelenléte, különösen gyermekeknél és felnőtteknél, a vörösvértestek iránti megnövekedett igényt jelzi, amelyet vérzés, egyes rákos megbetegedések és vérszegénység okozhat. A legtöbb elemző képes ezeket a sejteket kimutatni a differenciális sejtszám alapján. A magas sejtmagos vörösvértestek hamisan magas fehérvérsejtszámot okozhatnak, ami módosítást igényel.

Egyéb paraméterek

A fejlett hematológiai elemzők új méréseket végeznek a vérsejtekben, amelyek diagnosztikai jelentőséggel bírtak a kutatások során, de még nem találtak széles körű klinikai alkalmazást. Például bizonyos típusú analizátorok koordináta -leolvasást végeznek, amely jelzi az egyes fehérvérsejt -klaszterek méretét és helyzetét. Ezeket a paramétereket (úgynevezett sejtpopulációs adatok) tanulmányozták, mint a vérbetegségek, bakteriális fertőzések és malária lehetséges markereit. Azok az elemzők, amelyek mieloperoxidáz festést alkalmaznak differenciálszámok előállítására, meg tudják mérni az enzim fehérvérsejtek expresszióját, amely különböző rendellenességek esetén megváltozik. Egyes műszerek az átlagos MCHC -érték mellett a hipokróm vörösvérsejtek százalékos arányát is jelenthetik, vagy a töredezett vörösvérsejtek ( schistocyták ) számát is megadhatják , amelyek bizonyos típusú hemolitikus anaemia esetén fordulnak elő. Mivel ezek a paraméterek gyakran bizonyos elemzőmárkákra jellemzőek, a laboratóriumoknak nehéz értelmezniük és összehasonlítaniuk az eredményeket.

Referencia tartományok

A teljes vérképet úgy értelmezik, hogy összehasonlítják a kimenetet a referenciatartományokkal, amelyek a látszólag egészséges emberek 95% -ánál talált eredményeket tükrözik. A statisztikai normál eloszlás alapján a vizsgált minták tartományai nemtől és életkortól függően változnak. A felnőtt nők átlagosan alacsonyabb hemoglobin-, hematokrit- és vörösvérsejtszám -értékekkel rendelkeznek, mint a férfiak; a különbség csökken, de még mindig jelen van a menopauza után .

Az újszülöttek vére nagyon különbözik az idősebb gyermekek vérétől, ami megint különbözik a felnőttek vérétől. Az újszülöttek hemoglobinja, hematokritje és vörösvérsejt -száma rendkívül magas, hogy kompenzálja az alacsony oxigénszintet az anyaméhben, és magas a magzati hemoglobin aránya , amely kevésbé hatékony az oxigénszállításhoz a szövetekhez, mint a érett hemoglobin vérsejtek. Az MCV is megemelkedik, és a fehérvérsejtszám emelkedik a neutrofilek túlsúlyával. A vörösvértestek száma és a kapcsolódó értékek röviddel a születés után csökkenni kezdenek, körülbelül két hónapos korban éri el a legalacsonyabb pontot, majd ezt követően nő. Az idősebb csecsemők és gyermekek vörösvérsejtjei kisebbek, alacsonyabb az MCH, mint a felnőtteké. A gyermekkori fehérvérsejt -differenciálásban a limfociták gyakran meghaladják a neutrofileket, míg a felnőtteknél a neutrofilek vannak túlsúlyban.

A populációk közötti egyéb különbségek befolyásolhatják a referenciatartományokat: például a magasabb tengerszint feletti magasságban élő emberek hemoglobin-, hematokrit- és vörösvértest -eredményei magasabbak, míg az afrikai örökségű emberek átlagosan alacsonyabb fehérvérsejtszámmal rendelkeznek. A CBC futtatásához használt analizátor típusa hatással van a referenciatartományokra is. A referenciatartományokat ezért az egyes laboratóriumok határozzák meg saját betegpopulációik és felszereléseik alapján.

Korlátozások

Egyes egészségügyi állapotok vagy a vérmintával kapcsolatos problémák pontatlan eredményeket adhatnak. Ha a minta láthatóan alvadt, amit a rossz phlebotomia technika okozhat , akkor alkalmatlan a vizsgálatra, mert a vérlemezkeszám hamisan csökken, és más eredmények kórosak lehetnek. A szobahőmérsékleten több órán át tárolt minták hamisan magas értékeket adhatnak az MCV -re, mivel a vörösvértestek megduzzadnak, amikor vizet szívnak fel a plazmából; és a vérlemezke- és fehérvérsejt -differenciál eredmények pontatlanok lehetnek az idős mintákban, mivel a sejtek idővel lebomlanak.

Vörösvérsejtek agglutinációja : a vérkeneten vörösvértestek csomói láthatók

Az olyan személyektől vett minták , amelyek plazmájában nagyon magas a bilirubin- vagy lipidszint (ezeket icterikus mintának vagy lipémiás mintának nevezik), hamisan magas értékeket mutathatnak a hemoglobinra, mivel ezek az anyagok megváltoztatják a minta színét és opacitását. zavarja a hemoglobin mérését. Ez a hatás mérsékelhető, ha a plazmát sóoldattal helyettesítik.

Néhány ember ellenanyagot termel, amely vérlemezkeit csomók képzésére készteti, amikor vérüket EDTA -t tartalmazó csövekbe szívják, a tipikusan CBC minták gyűjtésére használt antikoaguláns. Az automatizált analizátorok a vérlemezke -csomókat egyetlen vérlemezkének számíthatják, ami tévesen csökkent vérlemezkeszámhoz vezet. Ez elkerülhető alternatív véralvadásgátló, például nátrium -citrát vagy heparin használatával .

Egy másik antitest által közvetített állapot, amely befolyásolhatja a teljes vérkép eredményét, a vörösvértestek agglutinációja . Ez a jelenség a vörösvérsejtek összetapadását okozza a sejtfelszínhez kötött antitestek miatt. A vörösvértestek aggregátumait az elemzőegység egyetlen sejtként számolja, ami jelentősen csökkent vörösvérsejtszámhoz és hematokrithoz, valamint jelentősen emelkedett MCV és MCHC értékhez vezet. Gyakran előfordul, hogy ezek az antitestek csak szobahőmérsékleten aktívak (ebben az esetben hideg agglutinineknek nevezik őket ), és az agglutináció megfordítható a minta 37 ° C -ra (99 ° F) történő felmelegítésével. A meleg autoimmun hemolitikus anaemiában szenvedő emberek mintái vörösvértest -agglutinációt mutathatnak, amely nem oldódik felmelegedéskor.

Míg a robbantásos és limfóma sejtek azonosíthatók a kézi differenciálműben, a mikroszkópos vizsgálat nem tudja megbízhatóan meghatározni a sejtek vérképző vonalát . Ez az információ gyakran szükséges a vérrák diagnosztizálásához. A rendellenes sejtek azonosítása után további technikák, például áramlási citometriás immunofenotipizálás használható olyan markerek azonosítására , amelyek további információkat szolgáltatnak a sejtekről.

Történelem

Korai hemoglobinométer: a vérmintákat összehasonlították a referencia standardok színskálájával a hemoglobinszint meghatározásához.

Az automatizált sejtszámlálók bevezetése előtt a teljes vérkép -vizsgálatot manuálisan végezték el: a fehér- és vörösvérsejteket, valamint a vérlemezkéket mikroszkópokkal számolták meg. Az első személy, aki mikroszkópos megfigyeléseket tett közzé a vérsejtekről, Antonie van Leeuwenhoek volt , aki a Proceedings of the Royal Society of London 1674 -es levelében számolt be a vörösvértestek megjelenéséről . Jan Swammerdam néhány évvel korábban leírta a vörösvértesteket, de akkor nem tette közzé megállapításait. A 18. és 19. század folyamán a mikroszkóp -technológia, például az akromatikus lencsék fejlődése lehetővé tette a fehérvérsejtek és a vérlemezkék számolását a festetlen mintákban.

Karl Vierordt fiziológus nevéhez fűződik az első vérkép elvégzése. Az 1852 -ben publikált technikája során gondosan mért vérmennyiséget szívott fel egy kapilláris csőbe, és szétterítette egy tojásfehérjével bevont mikroszkóp tárgylemezre . Miután a vér megszáradt, megszámolta a tárgylemez minden sejtjét; ez a folyamat több mint három órát vehet igénybe. A Louis-Charles Malassez által 1874 - ben bevezetett hemocitométer leegyszerűsítette a vérsejtek mikroszkopikus számlálását. A Malassez hemocitométere egy lapos kapilláriscsövet tartalmazó mikroszkóp tárgylemezből állt. Hígított vért juttattak a kapilláris kamrába az egyik végéhez rögzített gumicső segítségével, és egy skálázott rácsos szemlencsét rögzítettek a mikroszkóphoz, lehetővé téve a mikroszkóp számára, hogy megszámolja a sejtek számát egy vérmennyiségben. 1877-ben William Gowers feltalált egy hemocitométert, amely beépített számlálórácsot tartalmaz, így nincs szükség külön kalibrált szemlencsék gyártására minden mikroszkóphoz.

Dmitri Leonidovich Romanowsky találta ki a Romanowsky festést.

Az 1870 -es években Paul Ehrlich kifejlesztett egy festési technikát egy savas és bázikus festék kombinációjával, amely megkülönbözteti a különböző típusú fehérvérsejteket és lehetővé teszi a vörösvérsejtek morfológiájának vizsgálatát. Dmitri Leonidovich Romanowsky az 1890 -es években továbbfejlesztette ezt a technikát, eozin és érlelt metilén -kék keverékét használva , hogy olyan árnyalatok széles skáláját állítsa elő, amelyek nincsenek jelen, ha egyik festéket sem használják egyedül. Ez lett az alapja a Romanowsky festésnek, a technikának, amelyet még mindig használtak a vérkenetek festésére kézi ellenőrzés céljából.

Az első technikákat a hemoglobin mérésére a 19. század végén dolgozták ki, és a hígított vér színének vizuális összehasonlítását jelentették egy ismert szabványhoz képest. Ennek a folyamatnak a spektrofotometriával és kolorimetriával történő automatizálására tett kísérleteket korlátozta az a tény, hogy a hemoglobin sokféle formában van jelen a vérben, vagyis nem lehet egyetlen hullámhosszon mérni . 1920 -ban bevezettek egy módszert a hemoglobin különböző formáinak egy stabil formává történő átalakítására (ciánmethemoglobin vagy hemiglobincianid), amely lehetővé teszi a hemoglobin szintjének automatikus mérését. A ciánmethemoglobin módszer továbbra is referencia módszer a hemoglobin mérésére, és sok automatizált hematológiai elemzőben még mindig használják.

Maxwell Wintrobe nevéhez fűződik a hematokrit -teszt feltalálása. 1929 -ben PhD -projektet vállalt a Tulane -i Egyetemen, hogy meghatározza a vörösvérsejt -paraméterek normál tartományát, és feltalálta a Wintrobe hematokrit néven ismert módszert. A hematokrit méréseket korábban már leírták a szakirodalomban, de Wintrobe módszere annyiban különbözött, hogy egy nagy csövet használt, amelyet precíz előírásoknak megfelelően, tömegbe állítva lehetett gyártani, beépített skálával. A vörösvértestek frakcióját a csőben centrifugálás után mértük a hematokrit meghatározására. A hematokrit -értékek meghatározására alkalmas reprodukálható módszer feltalálása lehetővé tette a Wintrobe számára a vörösvérsejt -indexek meghatározását.

A modell Coulter számláló

Az automatizált sejtszámlálással kapcsolatos kutatások a 20. század elején kezdődtek. A kidolgozott módszer 1928-ban használt fény mennyiségét továbbított keresztül hígított vérminta, mért fotometriás, hogy megbecsüljük a vörösvértestek száma, de ez bizonyult pontatlan minták rendellenes vörösvérsejtek. Az 1930 -as és 1940 -es években más sikertelen kísérletek során a mikroszkópokhoz rögzített fotoelektromos detektorokat használták, amelyek megszámolták a sejteket a beolvasás során. A negyvenes évek végén Wallace H. Coulter , a Hirosima és Nagasaki bombázását követő jobb vörösvérsejt -számláló módszerek iránti igény alapján , megpróbálta javítani a fotoelektromos sejtszámlálási technikákat. Kutatásait bátyja, Joseph R. Coulter segítette egy chicagói alagsori laboratóriumban. Eredményeik fotoelektromos módszerekkel csalódást okoztak, és 1948 -ban, miután elolvasta egy tanulmányt, amely a vér vezetőképességét a vörösvértestek koncentrációjához viszonyította, Wallace megalkotta a Coulter -elvet - azt az elméletet, hogy a vezető közegben felfüggesztett sejt az áram arányának csökkenését eredményezi méretére, amint áthalad egy nyíláson.

Októberben Wallace pultot épített az elv bemutatására. Az anyagi korlátok miatt a nyílást úgy készítették el, hogy egy lyukat égettek egy cigarettacsomagból származó celofándarabon. Wallace szabadalmat nyújtott be a technikához 1949 -ben, és 1951 -ben a Tengerészeti Kutatási Hivatalhoz fordult a Coulter számláló fejlesztésének finanszírozására . Wallace szabadalmi kérelmét 1953 -ban jóváhagyták, és miután javították a rekesznyílást és bevezettek egy higanymanométert a minta méretének pontos szabályozása érdekében, a testvérek 1958 -ban megalapították a Coulter Electronics Inc. -t műszereik forgalmazására. A Coulter számlálót eredetileg a vörösvértestek számlálására tervezték, de későbbi módosításokkal hatékonynak bizonyult a fehérvérsejtek számlálására. A csoroszlyaszámlálókat széles körben alkalmazták az orvosi laboratóriumok.

Az első analizátor, amely egyszerre több sejt számot tudott előállítani , az 1965 -ben megjelent Technicon SMA 4A -7A volt. Ezt úgy érte el, hogy a vérmintákat két csatornára osztotta fel: az egyik a vörös- és fehérvérsejtek számlálására, a másik pedig a hemoglobin mérésére. A műszer azonban megbízhatatlan volt és nehezen karbantartható. 1968 -ban megjelent a Coulter Model S analizátor, amely széles körben elterjedt. A Technicon műszerhez hasonlóan két különböző reakciókamrát használt, amelyek közül az egyiket a vörösvértestek számának, a másikat pedig a fehérvérsejtszám és a hemoglobin meghatározására használták. Az S modell meghatározta az átlagos sejtmennyiséget is impedancia mérésekkel, amelyek lehetővé tették a vörösvértestek és a hematokrit meghatározását. Az automatizált vérlemezkeszámlálást 1970-ben vezették be a Technicon Hemalog-8 műszerével, és a Coulter S Plus sorozatú elemzői 1980-ban alkalmazták.

Az alapvető sejtszámlálás automatizálása után a fehérvérsejt -differencia továbbra is kihívás maradt. Az 1970 -es években a kutatók két módszert vizsgáltak a differenciálszámlálás automatizálására: a digitális képfeldolgozást és az áramlási citometriát. Az 1950 -es és 60 -as években kifejlesztett technológiát alkalmazva a Pap -kenetek olvasásának automatizálására számos képfeldolgozó elemző modellt állítottak elő. Ezek az eszközök egy festett vérkenetet vizsgálnak, hogy sejtmagot találjanak, majd nagyobb felbontású pillanatfelvételt készítenek a sejtről, hogy denzitometriás módszerrel elemezzék . Drágák voltak, lassúak, és alig csökkentették a laboratóriumi munkaterhelést, mert még mindig szükség volt a vérkenetek előkészítésére és festésére, így az áramlási citometrián alapuló rendszerek egyre népszerűbbek lettek, és 1990-re a digitális képelemző készülékek nem voltak kereskedelmi forgalomban. Egyesült Államok vagy Nyugat -Európa. Ezek a technikák a 2000 -es években újjáéledtek a fejlettebb képanalízis platformok bevezetésével mesterséges neurális hálózatokat használva .

A korai áramlási citometriás készülékek fénysugarakat lőttek a meghatározott hullámhosszú sejtekre, és megmérték a kapott abszorbanciát, fluoreszcenciát vagy fényszórást, információkat gyűjtöttek a sejtek jellemzőiről, és lehetővé tették a sejtek tartalmának, például a DNS -nek a számszerűsítését. Az egyik ilyen eszköz - a gyorssejtes spektrofotométer, amelyet Louis Kamentsky fejlesztett ki 1965 -ben a méhnyak citológiájának automatizálására - citokémiai festési technikák segítségével vérsejt -szórásképeket hozhat létre. Leonard Ornstein, aki segített a Rapid Cell Spectrophotometer festési rendszerének kifejlesztésében, és kollégái később megalkották az első kereskedelmi forgalomban lévő citometrikus fehérvérsejt -differenciál -elemzőt, a Hemalog D -t. festés az öt normál fehérvérsejt -típus azonosítására a "nagy azonosítatlan sejtek" mellett, amely osztályozás általában atipikus limfocitákból vagy robbanássejtekből állt. A Hemalog D 10 000 cellát tudott megszámolni egy menetben, ami jelentős javulás a kézi differenciálhoz képest. 1981-ben a Technicon egyesítette a Hemalog D-t a Hemalog-8 analizátorral, hogy elkészítse a Technicon H6000-et, az első kombinált teljes vérkép- és differenciál-analizátort. Ez az analizátor nem volt népszerű a hematológiai laboratóriumok körében, mert munkaigényes volt az üzemeltetése, de az 1980-as évek végén és az 1990-es évek elején hasonló rendszereket széles körben gyártottak más gyártók, például a Sysmex , az Abbott , a Roche és a Beckman Coulter .

Magyarázó megjegyzések

Hivatkozások

Idézetek

Általános bibliográfia